巨噬细胞胞内因子检测

董董

我想做组织内巨噬细胞胞内因子，如果用LPS刺激，有可能使本来是M2的巨噬细胞向M1转变从而改变细胞因子吗，可以用PMA刺激吗，谢谢

niwanmao

LPS会诱导巨噬细胞偏向M1分化，分泌促炎因子。
但是使已经是M2的巨噬转向M1，估计会比较困难，不过我大致找了一下，也没有找到可靠的依据说肯定有或肯定没有，所以需要有做巨噬细胞相关研究的站友出来现身说法。

至于PMA，我只看到可以诱导THP-1分化为巨噬细胞，未见到其它报道。

董董

我查到的也是PMA促进单核细胞分化为M0，有一篇文章说可以刺激HL-60细胞分泌促炎因子，原话是“PMA induced the activation of the MAP kinase-NFB pathway and the production of pro-inflammatory cytokines in differentiated monocytes”那如果是这样，会不会使我本来不分泌促炎因子的巨噬细胞分泌了IL1,IL6这些。

niwanmao

董董 发表于 2020-5-9 17:35
我查到的也是PMA促进单核细胞分化为M0，有一篇文章说可以刺激HL-60细胞分泌促炎因子，原话是“PMA induced  ...

会的。
但是目前未看到使M2转换为M1的证据。

董董

谢谢老师回复，刚看到一篇文章《Two patterns of cytokine production by placental macrophages》，用LPS刺激巨噬细胞，不刺激组和刺激组相比，IL6,IL1-b,TNF这些促炎因子会增多，两组之间增多幅度不同，IL17,TGF-b这些因子变化不大，我是否可以理解为LPS只是放大了两组巨噬细胞本来的能力，只要有差异就能说明问题。而那些不增多的因子有没有可能不是通过LPS这条通路分泌，所以才不增高。

董董

文献中的图片

niwanmao

董董 发表于 2020-5-10 12:20
谢谢老师回复，刚看到一篇文章《Two patterns of cytokine production by placental macrophages》，用LPS ...

我觉得不叫放大功能吧，只是利用LPS把巨噬细胞本身的功能给体现出来，体现的指标就是那几个细胞因子。
打个比方，一群士兵和一群普通人混在一起，如何区分，没有刺激的情况，两群都可通过表型区分，至于功能上，可能平时有部分士兵有在训练，功能因子可以看出来一点，但只能看出一点；但是当我们让几个坏蛋进去捣乱（就是刺激），此时，所有的士兵或者绝大部分都出动了，相当于功能因子明显增高了，普通人不会反应，只会逃，这样就轻易把两群人分开来，但是刺激改变了士兵和普通人的身份吗？没有。
我是这么理解的。

董董

生动，绝对的生动。那有没有一种可能，那些刺激了也不变的细胞因子，不是通过LPS作用通路合成的，所以即使刺激了也不增多。我是做病毒的，而LPS是类似G-菌，会不会不合适。LPS和PMA刺激有什么区别。

niwanmao

董董 发表于 2020-5-10 22:31
生动，绝对的生动。那有没有一种可能，那些刺激了也不变的细胞因子，不是通过LPS作用通路合成的，所以即使 ...

LPS是通过TLR受体。
PMA是通过钙离子通道。

董董

老师您好，我现在在做预实验，在用LPS刺激的时候，用培养板孵育，因为是贴壁细胞，后面消化时会损失一些细胞，也许对细胞活性也有一些影响，可否直接在流失管里刺激敷育，谢谢。