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[其它临床检测] 小鼠外周血检测MDSC如何分析

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发表于 2020-5-9 09:44:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
      各位老师好,最近做一个小鼠外周血测MDSC的,原本是想免疫磁珠分选获得P-MDSC和G-MDSC,然后再流式分析LY6G和CD11b的MDSC表达。但是这边条件限制做不了分选,所以尝试着血样裂红标记LY6G和CD11b抗体直接检测。     之前浏览了大家小鼠MDSC主要标记GR-1CD11b,LY6G,LY6c,然后LY6G和CD11b在粒细胞、单核细胞都会表达,上机的时候也发现主要集中在“单核”那群细胞
      试着不同圈门分析得到以下结果,不确定哪种方式比较正确,或者我可以选中所有细胞,圈选CD11+,再看LY6G的表达情况吗?
      不知道有没有比较可行的方法不用分选,检测MDSC的?

细胞分群

细胞分群

圈门方式1

圈门方式1

圈门方式2

圈门方式2

圈门方式3

圈门方式3




 楼主| 发表于 2020-5-10 16:49:35 | 显示全部楼层
EI,实验经验不足,还望各位老师指导一下哈。
发表于 2020-5-11 08:56:41 | 显示全部楼层
2017年回答过一个小鼠MDSC的问题,供参考:https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6088-1-1.html
 楼主| 发表于 2020-5-11 10:13:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-11 08:56
2017年回答过一个小鼠MDSC的问题,供参考:https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6088-1-1.html ...

嗯嗯,谢谢老师,分析时有借鉴以上帖子,检测MDSC基础的都需要标记GR-1CD11b,LY6G,LY6c这4个吗?像我只标记LY6G和CD11b两个抗体的话来判断MDSC的是不是分群不够充分?
发表于 2020-5-11 16:09:30 | 显示全部楼层
做分析的话,本来也不用分选吧?直接标记抗体上机看比例么。
一般分选出来的,会拿传出来的细胞做下一步实验,比如培养了,提取蛋白或者RNA的,不了解为啥要分选之后再检测
发表于 2020-5-11 17:54:45 | 显示全部楼层
小鹿 发表于 2020-5-11 10:13
嗯嗯,谢谢老师,分析时有借鉴以上帖子,检测MDSC基础的都需要标记GR-1CD11b,LY6G,LY6c这4个吗?像我只标 ...

只有Ly6G和CD11b分不开的。
 楼主| 发表于 2020-5-12 09:44:04 | 显示全部楼层
liuruiluna 发表于 2020-5-11 16:09
做分析的话,本来也不用分选吧?直接标记抗体上机看比例么。
一般分选出来的,会拿传出来的细胞做下一步实 ...

本意可能是想获取总的MDSC细胞,然后看一下其中LY6G和CD11b分群的比例。
 楼主| 发表于 2020-5-12 09:47:26 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-11 17:54
只有Ly6G和CD11b分不开的。

好的,了解。感谢老师解答
发表于 2020-5-15 14:01:24 | 显示全部楼层
小鹿 发表于 2020-5-12 09:44
本意可能是想获取总的MDSC细胞,然后看一下其中LY6G和CD11b分群的比例。

这些都可以在不用分选的情况下直接流式分析出来。而且分选过程中也有丢失目标细胞的可能。我个人认为分选不是很必要
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