检验干细胞标志物的流式做方法学验证的时候需要标准干.....

cellprobe

用流式检测干细胞的标志物，按照要求需要做方法学验证，验证的时候需要从ATCC买干细胞做为标准干细胞吗？

niwanmao

HSC?
MSC?

cellprobe

niwanmao 发表于 2020-6-16 07:53
HSC?
MSC?

MSC  CD73 CD90 CD105 HLA-DR  CD14  CD19 CD34 CD45

刘小黑

老师，你们这个验证做完了吗？验证中试用的其他不表达细胞用的什么细胞？

我是超人我怕啥

老师，这个做完了吗，可以分享下吗

niwanmao

我是超人我怕啥 发表于 2023-11-22 14:23
老师，这个做完了吗，可以分享下吗

间充质干细胞检测怎么合适地制备单染管调节补偿？
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-10879-1-1.html
(出处: 流式中文网)


这个帖里面不是讨论了吗？

范晋波

您说的是阳性参考么？应该不需要

sunny2829

方法学验证的目的是证明所开发的方法能够满足检测的要求。检测的目的不同，对方法的要求也不同，验证的程度也就不同。进行方法学验证简单来说就是遵循官方指导原则（各国药典、CDE、ICH等），对方法的专属性、系统适用性、定量限、检测限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证，证明其符合相关要求。

由于各项指导原则只是宽泛的描述与规定，并没有具体操作和实施的细节，每个人对指导原则的理解不尽相同，因此对于方法学验证可以说是千人千面，各有各的特色。方法学验证并没有绝对的对与错之分，只要能客观合理的证明方法的可行性，就是合格的方法学验证。

如果有标准干细胞作为阳性样本，结果会更可靠吧，个人观点哈。

我是超人我怕啥

niwanmao 发表于 2023-11-22 14:25
间充质干细胞检测怎么合适地制备单染管调节补偿？
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-10879-1-1.html
( ...

是的，现在方法已经建立，抗体滴定做完了，结果跟预期差别很大，我是在阳性指标管里加入了未染色的细胞进行流式上机，但是发现就算是多洗几遍也还会有残留抗体，最后想的是直接分析阳性群的MFI来确定抗体用量，在阴性指标里加入了PBMC细胞结果还是可以的，现在到了做方法学验证这一步，关于流式方法学验证方面的资料还是很少的。

Yuck

我是超人我怕啥 发表于 2023-11-24 14:36
是的，现在方法已经建立，抗体滴定做完了，结果跟预期差别很大，我是在阳性指标管里加入了未染色的细胞进 ...

方法学验证现在大多数是按照那篇文献进行，有一篇文献综述。我记得是2018年那篇。