用于监测自身免疫性疾病抗CD20治疗效果的ISCCA流式方案

niwanmao

抗CD20单克隆抗体（MoAb）用于多种自身免疫性疾病。目的是消除那些导致组织损伤和致病性自身抗体产生的记忆B细胞，同时保留Naive B细胞。记忆B细胞的消失和Naive B细胞的补充与良好的临床反应相关，而记忆B细胞和成熟浆细胞的重新出现，则与复发或对治疗的耐药性相关。
抗CD20治疗后，会导致极低的B细胞水平，需要高分辨率流式技术。这里介绍一个由意大利临床细胞分析学会（ISCCA）推荐的免疫监测方案，用于为自身免疫性疾病抗CD20治疗期间的临床决策过程提供标准化方法。

方案
八色方案，10个抗体组成，包括（CD20-V450，CD45-V500c，CD4-FITC sIgM-FITC，CD38-PE，CD3-PerCP Cy5.5，CD19-PE-Cy7，CD27-APC，CD8 -APC H7 ，sIgG-APC-H7），区分B细胞、浆细胞/浆母细胞、Naive B和记忆B细胞、sIgM和sIgG转换记忆B细胞、T和NK细胞，并能进行高灵敏度分析（> 106 CD45+细胞）。


设门方法



抗CD20治疗后，大多数患者的B细胞水平几乎为零。如果B细胞实际上仍然不存在（<0.1个/μl），则B细胞亚群的评估既不可靠也不有意义。如果B细胞升高到>0.3-0.5个/μl，则可以分出亚群且提供预后相关信息，但需要获取到足够的CD45+细胞数（>1.0-1.5×106）。如果B细胞比较容易检测到（>1个/μl），记忆B细胞明显存在，则表明无反应或可能复发。
所以以后对自身免疫性疾病患者进行标准化前瞻性监测的时候，建议采用ISCCA方案，以帮助安全合理地使用抗CD20疗法。

信源：Gatti A, Buccisano F, Scupoli MT, Brando B. The ISCCA flow protocol for the monitoring of anti-CD20 therapies in autoimmune disorders [published online ahead of print, 2020 Jun 29]. Cytometry B Clin Cytom. 2020;10.1002/cyto.b.21930. doi:10.1002/cyto.b.21930

qingfengguo68

您好倪老师，请教您，流式检测因子为什么会有那么多粘连（a中第二幅图）。是抗体间会产生吸附么？

niwanmao

qingfengguo68 发表于 2020-7-23 11:01
您好倪老师，请教您，流式检测因子为什么会有那么多粘连（a中第二幅图）。是抗体间会产生吸附么？ ...

粘连的产生不可避免。
你这里所说的检测因子，是指CBA法检测血清细胞因子吗？如果是的话，可能是微球未充分打散。