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[流式分选] 细胞分选

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发表于 2011-4-3 12:56:59 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
倪老师及各位:
好!
最近在做细胞分选,遇到几个问题:1.分选出的细胞纯度不高,最多的时候才有80%左右
2.分选出来的细胞用于做增殖(CFSE)标记,发现培养一天后就出现很多的细胞碎片,两天碎片更多。细胞是死亡了?
不知道有没有相关的经验和注意点,请多多指教。谢谢!

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发表于 2011-4-3 14:15:40 | 显示全部楼层

1、分选问题请stef1981版主出面解答,我没做过,但我觉得应该机器有关吧。
2、CFSE应该是比较难做的,你可以看看这个话题的讨论:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=851


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 楼主| 发表于 2011-4-5 09:29:30 | 显示全部楼层
好的,谢谢倪老师!
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发表于 2011-4-7 09:30:05 | 显示全部楼层
从我的分选经验来看,sheath对分选的纯度影响很大

点评

感谢分享宝贵经验。那么看来鞘液是一方面因素了。  发表于 2011-4-7 10:03
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发表于 2011-4-7 11:01:56 | 显示全部楼层
肯定是的,我有过这方面的教训
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发表于 2011-4-7 14:17:10 | 显示全部楼层
楼上的老兄是分选的过来人,能否介绍一点经验?
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 楼主| 发表于 2011-4-12 21:18:10 | 显示全部楼层
zhouyanhong 发表于 2011-4-7 09:30
从我的分选经验来看,sheath对分选的纯度影响很大

您好!可否详细介绍下经验?我们用的是PBS。
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发表于 2011-4-13 08:28:26 | 显示全部楼层
PBS是你自己配置的还是从公司买的,如果自己配置的话,工作浓度是否确定为1X?
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 楼主| 发表于 2011-4-16 18:50:27 | 显示全部楼层
回复 zhouyanhong 的帖子

是自己配的,平时也都用来洗细胞的,没问题的。
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 楼主| 发表于 2011-4-16 18:51:36 | 显示全部楼层
回复 zhouyanhong 的帖子

不知道您平时是用什么?是购买的产品吗?什么公司的?
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