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流式不仅可测血型,而且还可明确血清学无法确定的血型

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发表于 2020-7-21 18:17:30 | 显示全部楼层 |阅读模式

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ABO不相容输血可能引起严重的血管内溶血反应,甚至危及生命。在输注不相容血液后,或者红细胞数量增加的情况下,通过常规血清学方式明确血型就非常困难。
基因分型是一种补充方法,但分子检测至少需要3小时,并且必须在组织样本上进行。最近还有个例报道患者不相容输血后通过基因分型定错了血型,导致进一步不相容的输血(Akria et al.,2017),如Akria等人所述,即使最少的非自体细胞“污染”也可能产生假血型。说明基因分型也是无法区分不相容输血后的正确血型。
以色列的Zivony Y等人采用了流式检测未成熟网织红细胞的血型,从而能快速、简单地确定真正的受者血型。
受者全血或血库供者血以PBS稀释后,取50ul,加入CD71、CD45、抗A、抗B等抗体孵育10分钟,接着加入1ml 噻唑橙染料孵育30分钟,最后上机获取,设门如下:
20200721_073130.jpg

根据上述设门,分析受者血和供者库存血混合后的结果如下图,红色为总的红细胞,土黄色为总的网织红细胞,蓝色为未成熟网织红细胞。
20200721_073214.jpg


从上图可见,流式细胞术可以检测血清学检测不到的小亚群,并且因为不需要进行DNA提取或PCR反应,可以在大约一个小时内获得结果,对于创伤患者,这种时间优势可能至关重要。流式细胞术的另一个优势是多参数分析,可以通过使用转铁蛋白受体(CD71)和噻唑橙(TO)RNA荧光染料作为网织细胞的成熟度指标来鉴定受体血与供体血。 CD71和噻唑橙的双参数分析表明,尽管网织红细胞也存在于供者血中,但绝大多数供者血的未成熟网织红细胞水平可以忽略不计。

根据作者计算,流式细胞仪试剂的成本分析为每个样品$5.50,从样品收集到计算机分析的总时间约为一个小时。说明流式细胞仪分析未成熟网织红细胞上的血型相对容易,快速且不昂贵。

信源:Zivony Y, Eshel E, Brodsky V, Matanis M, Morani H, Dally N. Blood type by immature reticulocyte immunophenotype flow cytometry [published online ahead of print, 2020 Jul 17]. Cytometry B Clin Cytom. 2020;10.1002/cyto.b.21934. doi:10.1002/cyto.b.21934
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发表于 2021-5-29 11:08:57 | 显示全部楼层
老师 您好 请问一下  抗A 抗B的抗体是在哪里购买的
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发表于 2024-8-4 22:55:22 | 显示全部楼层
老师,您好f和g两个figure没有看懂,可以解释一下吗?
f图是将B型血与供着A型血混合,那怎么在不知道血型的情况下,查出患者的真实血型呢?我只看到鉴定除了未成熟的网织红细胞,那怎么知道受者是什么血型呢?
没搞明白,请老师讲一下哈。感谢
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 楼主| 发表于 2024-8-5 12:24:56 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2024-8-4 22:55
老师,您好f和g两个figure没有看懂,可以解释一下吗?
f图是将B型血与供着A型血混合,那怎么在不知道血型的 ...

上文中,是为了确认血库的血,跟患者血混合后的网织红里面是否有相关影响输血的异种抗原。

只做血型,是很简单的,做一管抗A和抗B即可,就看抗A、抗B是否阳性,A阳=A型,B阳=B型,AB均阳=AB型,AB均阴=O型
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发表于 2024-8-7 01:09:08 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-8-5 12:24
上文中,是为了确认血库的血,跟患者血混合后的网织红里面是否有相关影响输血的异种抗原。

只做血型,是 ...

老师,我觉得不太对。上文中应该是鉴定混合后,受者的血型而不是确认血库中的血型。
请老师指正。
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 楼主| 发表于 2024-8-7 09:08:32 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2024-8-7 01:09
老师,我觉得不太对。上文中应该是鉴定混合后,受者的血型而不是确认血库中的血型。
请老师指正。 ...

认真看我前面写的东西,我说的是:“为了确认血库的血,跟患者血混合后的网织红里面是否有相关影响输血的异种抗原。”

你凭空加上血型?
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发表于 2024-8-7 23:38:17 | 显示全部楼层
本帖最后由 Veblen 于 2024-8-8 00:09 编辑
niwanmao 发表于 2024-8-7 09:08
认真看我前面写的东西,我说的是:“为了确认血库的血,跟患者血混合后的网织红里面是否有相关影响输血的 ...

老师,图中检测到的蓝色那一群未成熟的网织红细胞是患者的还是血库供者的呢?这一群我看了一下应该是患者的,从而可以判断患者的血型。
标题是检测血型,我理解的就是来检测某些患者输血后来确认其血型的方法。
我这样理解对吗?
您说来确认网织红细胞是否有影响输血的异种抗原,我不太理解,几乎供者都没有不成熟网织红细胞,又何来异种抗原一说呢?
请老师指正一下哈,我是小白,谢谢老师。
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