本帖最后由 晴儿 于 2020-7-21 22:12 编辑
老师们好,麻烦指点一下:谢谢了
第一个问题:
老师们好,我想请教个问题,图一是小鼠淋巴结的流式图,横轴是FSC,纵轴是SSC,分群挺好,分界大概位于FSC的数值50左右。
用相同的电压检测小鼠的脾脏单细胞,图二显示的分群位置位于100左右,图三横轴是FSC,纵轴是CD4,左侧的细胞CD4也有阳性。那么图二我应该如何圈淋巴细胞。位于50左右还是100左右。可以不看图二,直接在图三圈CD4阳性细胞进行后续分析吗?
自己觉得电压不变的话,应该就都在50圈门了吧。那100的分界是怎么回事,为什么50没有分开。
还有左侧细胞的红细胞也会染上CD4的荧光吗,按照50圈门,左侧细胞还是会有CD4阳性。
第二个问题:
小鼠脾脏流式图,图1,2,3应用的不同的CD4的电压检测,450的时候有点压线,600的时候CD4分群在细胞中间,700的时候CD基本全阳性。这是怎么回事呢,应该怎么选择电压。按理说,电压不会影响CD4比例吧。
麻烦老师指点一下。谢谢
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