血小板白细胞聚集体检测数值为何偏高？

donghuan

求助，请问有没有人做过血小板和白细胞的聚集的流式检测，我用全血标记CD14、CD11b、CD8、CD4以及CD41，避光孵育15min后，用BD裂红液裂红（含甲醛）后上机检测，我的单核细胞、粒细胞、CD4和CD8细胞的血小板聚集均较文献报道增高两倍以上。我想知道是什么问题。我也尝试了全血先裂红，然后标抗体。也考虑是不是时间问题，我也保证了一小时内采血测，一小时内上机，可是还是很高。真心希望得到解答。流式图如下，展示的第一个群是淋巴细胞，第二个标的是CD8，第三个是CD41（log后）

niwanmao

首先，这块内容可参考书籍：https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... tid=64&pid=6303

其次，不知道你是否调节过补偿？补偿是否未调节到位？

donghuan

niwanmao 发表于 2020-9-8 14:22
首先，这块内容可参考书籍：https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=redirect&goto=findpost&ptid=64&p ...

倪老师您好，感谢您的回复，这个参考书，我之前查询帖子时候就看过了，跟我做的没有太大差异。补偿我的调节应该还可以。

niwanmao

donghuan 发表于 2020-9-8 14:31
倪老师您好，感谢您的回复，这个参考书，我之前查询帖子时候就看过了，跟我做的没有太大差异。补偿我的调 ...

双参数图是否放出来看一下？

donghuan

niwanmao 发表于 2020-9-8 14:41
双参数图是否放出来看一下？

donghuan

donghuan 发表于 2020-9-8 15:06

上面的是CD41、CD8双阳性细胞。CD41纵坐标log后，下面是CD41log后的图

niwanmao

donghuan 发表于 2020-9-8 15:06

PerCP-cy5.5是CD41？看上去这样的设门不正确。是否做过FMO对照？

donghuan

niwanmao 发表于 2020-9-9 14:00
PerCP-cy5.5是CD41？看上去这样的设门不正确。是否做过FMO对照？

老师，您好，不好意思才回复您，这个PerCP-cy5.5是CD41。我没有做FMO对照，但是我是根据阴性管设的门

niwanmao

donghuan 发表于 2020-9-27 15:57
老师，您好，不好意思才回复您，这个PerCP-cy5.5是CD41。我没有做FMO对照，但是我是根据阴性管设的门 ...

因为PE和PerCP-cy5.5之间存在补偿，所以建议做一个FMO对照。
从你这里图上的分群，我个人觉得门应该如下设置：

cenzhikang

您好，请问为什么我做的外周血几乎100%血小板和白细胞的聚集，请问是否需要所有操作都在常温进行，我看上面的文件说复温会导致血小板和白细胞的聚集