BD C6 plus 测细胞周期中荧光补偿的问题

ljw2020

请教各位，我最近用了BD C6流式细胞仪测了一种海水藻的细胞周期，用的染料是碘化丙啶（PI），通道是FL-2(PE)，需要设置荧光补偿吗？这个知识点一直搞不清楚，看资料说是多色实验时，要考虑荧光补偿，而我只用了一种荧光染料；但是流式仪器中的四个通道有两个通道 FL-3(PercP),FL-4（APC）用的荧光素是与藻蛋白相关的，所以不太清楚我的藻细胞中的蛋白会不会有影响，是否需要设置荧光补偿？

kahn8

单标不需要补偿~~你的意思是本底比较高？无法区分PE阳性和阴性？

zhangxuzhen

FL-3(PercP)与FL-2(PE)的补偿是需要根据实际情况调节的，你的澡蛋白可能会干扰PI荧光的检测。FL-4（APC）不需要

niwanmao

不用设置补偿，直接用FL2或FL3任选一个，看你们的机器上哪个通道激发效率更高

ljw2020

zhangxuzhen 发表于 2020-10-21 14:39
FL-3(PercP)与FL-2(PE)的补偿是需要根据实际情况调节的，你的澡蛋白可能会干扰PI荧光的检测。FL-4（APC） ...

最近又问问一位组里的老师，他说我用乙醇做固定处理时，会把这些蛋白和色素给破坏和提取出来，所以不用考虑补偿，不知道这样对不对

zhangxuzhen

那你可以在流式上机检测用空白对照是看一下这些通道是否有荧光，如果几乎没有 就可以不用考虑了

ljw2020

zhangxuzhen 发表于 2020-10-23 15:02
那你可以在流式上机检测用空白对照是看一下这些通道是否有荧光，如果几乎没有 就可以不用考虑了 ...

好的，谢谢您