自带GFP绿光的细胞做细胞凋亡AnnexinV FITC/PI检测,无双阳群,是为什么? 检测背景:细胞转入 自带GFP绿光的病毒,用AnnexinV FITC/PI的组合检测细胞凋亡。对照组用高糖培养基处理,实验组用不同糖浓度培养基处理。理论上,细胞凋亡率增加,结果发现从对照管开始,对照管和实验管均 无双阳群(如下图)。
对照管,高糖浓度
实验管1,较高糖浓度
实验管2,最低糖浓度
有两点疑问:1.为何自带GFP绿光,却检测不到双阳群?照理来说,自发GFP绿光,应该会有FITC单阳群或双阳群。并且此次结果PI单阳群很明显,说明PI是能够染上的。 2.若细胞自带的荧光与AnnexinV的荧光抗体光谱重叠,在不改变荧光抗体组合的情况下,应该如何去计算细胞的凋亡率?(考虑到更换试剂的成本)
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