在线请教,我按照染色指数的方法来做抗体的滴度验证,做一例标本能看得出趋势,但增加标本的例数,发现每个标本做出来的最佳染色指数所对应的最佳滴度都不一样,没有趋势性,我验证的BD CD19 APC,对其做了5个滴度,分别是5/4/3/2/1ul,分析方法是先通过前向/侧向把细胞碎片去掉,再把淋巴细胞单独圈出来,在淋巴细胞下面分别圈CD19+的细胞群体和阴性的淋巴细胞群,分别把CD19+的阳性细胞群、阴性的淋巴细胞群各自的Mean值和阴性的淋巴细胞rSD值show出来,通过染色指数的计算公式分别得出各自的SI值进行比较,但得出的结论都不一样。求各位老师帮忙解答,是我设门方法的问题还是其他因素原因?
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