如何做抗体滴定？

果儿

我想请教一下关于滴定的问题，我们之前做的一个实验，用的小鼠骨髓细胞，有两个抗体用微球做补偿时分群不明显，其他抗体分群都很明显。不知道什么原因，怀疑是不是抗体浓度不合适，想问问怎么做这两个抗体的滴定？下面这两个图是用微球调补偿时的图。BV421抗体浓度是0.2mg/ml  推荐用量是：≤0.5ug/100ul 1X106细胞
BV510抗体浓度：0.2mg/ml 推荐用量是：≤0.25ug/100ul 1X106细胞
如果做滴定的话 ，一下梯度是否合理？
BV421 滴定梯度：5ul（1ug）、2.5ul（0.5ug）、1.25ul（0.25ug）、0.625ul（0.125ug）、0.3（0.06ug）、0.15ul（0.03ug）、0ul   /100ul1X106细胞


BV510 滴定梯度：、2.5ul（0.5ug）、1.25ul（0.25ug）、0.625ul（0.125ug）、0.3（0.06ug）、0.15ul（0.03ug）、0.075ul（0.015ug）、0ul   /100ul1X106细胞

niwanmao

微球调补偿的图，与抗体滴定用量梯度的确定，是无关的。

抗体滴定的用量，一般从厂家推荐用量开始，往上2个点，往下4~5个点。

果儿

好的，明白了，谢谢倪老师

陈景飞

LZ,请问你说得微球是什么？

niwanmao

陈景飞 发表于 2020-11-15 23:59
LZ,请问你说得微球是什么？

compensation beads，有多个牌子。