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[标本处理] 肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的计数

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 楼主| 发表于 2020-11-13 11:10:39 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
您好,我想请教一下怎么用流式对肺泡灌洗液中的嗜酸性粒细胞和巨噬细胞进行计数。看文献里有用CD11c和SiglecF染色的,还有CD45是为了检测什么的?求各位指教怎么对肺泡灌洗液的炎症细胞计数,谢谢啦。

发表于 2020-11-13 14:20:45 | 显示全部楼层
@麦小光  站友那篇帖子(https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8626-1-1.html)从实验步骤到检测,都讲得比较详细,你可以参考一下。
发表于 2020-11-14 19:14:31 | 显示全部楼层
肺泡灌洗液里面的巨噬细胞是AM,CD11c和siglecF双阳,全肺细胞里面还有一部分肺间质巨噬细胞,是CD11b的,嗜酸粒细胞可以圈出CD11c阴性,siglecF阳性的群。
发表于 2020-11-14 19:18:39 | 显示全部楼层
图片1和图片2分别是正常情况下和炎症模型下的染色
图片1.png
图片2.png
发表于 2020-11-14 19:19:34 | 显示全部楼层
麦小光 发表于 2020-11-14 19:18
图片1和图片2分别是正常情况下和炎症模型下的染色

PE是siglecF,APC是CD11c,可以看到,正常情况下,嗜酸粒细胞的量很少,炎症模型里面剧增
发表于 2020-11-14 19:23:37 | 显示全部楼层
当然,我这个结果是全肺的,不是肺泡灌洗液,可以参考参考,不完全一样。炎症细胞计数就用一些染料就可以了,比如巨噬细胞可以用台盼蓝,巨噬细胞会吞噬台盼蓝,这些资料都可以查查然后试试
 楼主| 发表于 2020-11-16 11:42:52 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-11-13 14:20
@麦小光  站友那篇帖子(https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8626-1-1.html)从实验步骤到检测,都讲得比 ...

好的,谢谢老师。还想请教一个问题:动物取完材后,肺泡灌洗液在-80℃冻存了一个月,还可以用流式测肺泡灌洗液里面的巨噬细胞和嗜酸性粒细胞吗?
 楼主| 发表于 2020-11-16 11:43:24 | 显示全部楼层
麦小光 发表于 2020-11-14 19:18
图片1和图片2分别是正常情况下和炎症模型下的染色

好哒,谢谢你
发表于 2020-11-16 15:05:16 | 显示全部楼层
Liekkas 发表于 2020-11-16 11:42
好的,谢谢老师。还想请教一个问题:动物取完材后,肺泡灌洗液在-80℃冻存了一个月,还可以用流式测肺泡 ...

这种方式没试过,我感觉够呛,解冻之后细胞形态应该很差了
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