细胞固定第二天上机需要用PBS置换掉PFA吗？

陈景飞

倪老师及各位老师好：
提一个基础问题：做完流式染色之后，用2%的PFA固定细胞，第二天上机，上机前需要离心去除PFA，再用ice-cold PBS重悬细胞吗？直接PFA上机会有什么问题吗？另外固定用2%PFA可以吗？

niwanmao

首先，这个方式是非常不建议的，最好染色完之后即刻上机。固定后等第二天上机，是容易引起部分荧光衰减的，真要用，务必做好对比工作，确保无明显衰减再用。

PS：发帖提问，请务必发在提问版块，不要发在分享版块，这是第二个帖子了，我先转移过去，下不为例。谢谢配合。

陈景飞

niwanmao 发表于 2020-11-16 15:44
首先，这个方式是非常不建议的，最好染色完之后即刻上机。固定后等第二天上机，是容易引起部分荧光衰减的， ...

好的好的 谢谢倪老师一定注意！！
倪老师 你没有回答我的问题：我的问题是固定液PFA可以直接上机吗？还是一定要去除，用PBS重悬细胞再上机？谢谢您啦！

niwanmao

陈景飞 发表于 2020-11-16 23:13
好的好的 谢谢倪老师一定注意！！
倪老师 你没有回答我的问题：我的问题是固定液PFA可以直接上机吗？还是 ...

你没理解我的意思，我的意思是不建议固定过夜。而是做好直接上机。