求大神帮忙看看凋亡的图

wendylxd · 发表于 2021-1-12 19:13:57

本帖最后由 wendylxd 于 2021-1-12 19:27 编辑

各位老师好，流式新手小白想问下各位老师为什么我们没有用药处理的细胞凋亡了这么多？不知道问题出在哪里，是处理的问题吗？做PC3是铺6孔板两板，所有的用不含EDTA胰酶消化后一起处理的，第二次以为是胰酶的问题，做正常前列腺上皮细胞都是一孔一孔消化的，但还是有相同的问题。。

niwanmao · 发表于 2021-1-12 19:17:44

未用药的这个水平，可能跟培养的细胞状态有关。

快乐的搬砖人 · 发表于 2021-1-12 19:56:29

倪老师好，请问这个当时从板上取细胞前镜下看了一下细胞大概长到了80%左右，漂浮细胞也比较少，感觉细胞状态挺好的，用的不含EDTA的胰酶消化的，消化大概半分钟，难道是胰酶消化损伤了细胞？或者有其他因素造成了这种情况吗？麻烦大神们了。

wendylxd · 发表于 2021-1-12 20:08:05

niwanmao 发表于 2021-1-12 19:17
未用药的这个水平，可能跟培养的细胞状态有关。

倪老师好，这个当时从板上取细胞前镜下看了一下细胞大概长到了80%左右，漂浮细胞也比较少，感觉细胞状态挺好的，用的不含EDTA的胰酶消化的，消化大概半分钟，难道是胰酶消化损伤了细胞？或者有其他因素造成了这种情况吗？还有我们的图，相对阴性对照十字门都向右偏移了，想问问是什么原因，谢谢倪老师

快乐的搬砖人 · 发表于 2021-1-12 20:17:11

如果是胰酶消化造成的细胞状态不好，为什么加药的都是用相同的手法处理的，死的没有那么多呢？很疑惑，求大神解答

快乐的搬砖人 · 发表于 2021-1-12 20:30:05

niwanmao 发表于 2021-1-12 19:17
未用药的这个水平，可能跟培养的细胞状态有关。

倪老师好，请问这个当时从板上取细胞前镜下看了一下细胞大概长到了80%左右，漂浮细胞也比较少，感觉细胞状态挺好的，用的不含EDTA的胰酶消化的，消化大概半分钟，难道是胰酶消化损伤了细胞？如果是胰酶消化造成的细胞状态不好，为什么加药的都是用相同的手法处理的，死的没有那么多呢？或者有其他因素造成了这种情况吗？麻烦大神们了。

niwanmao · 发表于 2021-1-12 20:51:45

快乐的搬砖人发表于 2021-1-12 20:30
倪老师好，请问这个当时从板上取细胞前镜下看了一下细胞大概长到了80%左右，漂浮细胞也比较少，感觉细胞 ...

贴壁细胞，难怪呢。消化是会造成这样的。不过像你这样的比例，在贴壁细胞结果里面，已经算做的挺好的了。

wmj123456 · 发表于 2021-1-18 22:04:23

倪老师，单看未加药组，我觉得不太可能是贴壁细胞消化导致的假阳性，因为他消化时间才半分钟，而且看着细胞活力也不错，反而是十字门，如果统一再往右边移一点，那么未加药组的凋亡比例是否就不很高了？

niwanmao · 发表于 2021-1-19 08:40:06

wmj123456 发表于 2021-1-18 22:04
倪老师，单看未加药组，我觉得不太可能是贴壁细胞消化导致的假阳性，因为他消化时间才半分钟，而且看着细胞 ...

比例是不高的，十字门是应该按照群体分布往右移一点的。

wxd · 发表于 2021-1-19 18:30:14

可能是画门的差异导致的，如图所示，左边不同的画门方式会导致不同的结果

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