肿瘤细胞与T细胞共培养后，圈选CD8阳性T细胞遇到了问题。。

不二

实验做的是共培养总T细胞与肿瘤细胞系，收集以后圈CD8阳性T细胞，染色胞内因子检测。（CD8为FITC，胞内因子分别为PE和APC标记）
先上的样品管是 只染了FITC标记的CD8，和PE与APC同型的的单阳性对照管
首先SSC和FSC圈T细胞


然后圈的这个群中看FL1-FITC的情况如下图


可以看到细胞分三群，然后我想调节一下补偿，就打开一二通道的图


发现有一个斜向上的阳性角，这个管二通道应该是同型，阴性的，所以我想调补偿压下来，但是发现补偿调到很大也压不下来，会吧这百分之四十的细胞团压到线外，所以这个斜上的角是非特异性染色嘛。。。

niwanmao

图没传上来，点击你这个帖子下方的「编辑」按钮，进入编辑器之后，点击工具栏上的图片按钮上传即可。

Cecelia_y

看着像是死细胞，建议染死活。死细胞在流式图中位于对角线上，是非特异性染色造成的