全血裂红后洗细胞和不洗细胞上流式的区别

wmj123456 · 发表于 2021-1-23 10:59:47

倪老师，我想问下，目前在临床做外周血免疫表型，裂红之后是洗细胞还是不洗直接上流式检测？这两种方式显示在FSC和SSC流式图上有区别吗？我这边有2张图，第一张是裂红后不洗直接上机，P2群是淋巴细胞吗？方框那一群是红细胞吗？裂红后，红细胞已经涨破了，如果不洗，那么流式检测的是碎片，方框那一群应该是红细胞吧？第二张图是裂红后洗细胞检测的图？希望得到倪老师的回复。

Merci · 发表于 2021-1-23 12:47:14

跟溶血素有一点关系

wmj123456 · 发表于 2021-1-23 13:39:56

请问是什么意思呀？我想知道裂红后洗和不洗，第一张流式图上能不能检测到红细胞群体。如果是常规的含有氯化钠的商品化的科研的裂红液，不洗，是第2张那样的？第一张图的方框里是红细胞吗？谢谢

niwanmao · 发表于 2021-1-24 09:11:16

必须洗涤，一方面是去掉碎片，另一方面是排除一些未结合的荧光素抗体干扰。

wmj123456 · 发表于 2021-1-24 10:10:57

niwanmao 发表于 2021-1-24 09:11
必须洗涤，一方面是去掉碎片，另一方面是排除一些未结合的荧光素抗体干扰。 ...

倪老师，我们做科研的，一般都是要洗的，但是在临床上，是不是很多都不洗的呀，直接裂红后就上机了？
我就想问一下，第一张图里，方框里的那群的红细胞碎片，而P2群是淋巴细胞，门没有设错吧？
第二张图是经典的全血中三群细胞的分布，这应该是洗过之后的吧，因为左下角很少看到红细胞碎片。

niwanmao · 发表于 2021-1-24 10:57:00

wmj123456 发表于 2021-1-24 10:10
倪老师，我们做科研的，一般都是要洗的，但是在临床上，是不是很多都不洗的呀，直接裂红后就上机了？
我 ...

临床上也是必须要洗，不洗的操作是不合格的。
个别免洗的项目，是需要经过验证和规范化的。
哪个门是红细胞和碎片，需要看标记。其它信息都没有，无从判断。

wmj123456 · 发表于 2021-1-24 11:10:50

好的，谢谢倪老师。因为还没拿到原始数据，随后反设门看一下淋巴细胞的位置。

爱学习的大老虎 · 发表于 2021-1-25 10:29:29

楼主裂解洗后的图三群细胞好明显，裂解液买的是什么牌子的啊，我之前试过不洗和洗上机对比发现不洗的背景会高一些

sandylin · 发表于 2021-1-26 13:56:47

请问这是正常人的外周血吗？还有同问裂解液的牌子

niwanmao · 发表于 2021-1-26 20:56:15

爱学习的大老虎发表于 2021-1-25 10:29
楼主裂解洗后的图三群细胞好明显，裂解液买的是什么牌子的啊，我之前试过不洗和洗上机对比发现不洗的背景会 ...

自己配制氯化铵裂解液就行了呀。
氯化铵裂解液储存液和缓冲液的配制
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html
(出处: 流式中文网)

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[淋巴细胞亚群] 全血裂红后洗细胞和不洗细胞上流式的区别