关于斜角细胞和细胞死亡问题

半年y

各位老师大家好。
1. 想请问一下大家，这个大斜角是什么，阴性管也是如此，并且只在这两个通道间有特别大的斜角。样本是脾脏细胞，刺激四个半小时，但考虑不是死亡细胞的问题，因为如果把配伍换掉，不会出现这样的问题。
2. 一二图是不同天样本的同样处理的散点图，所有通道的电压都是一致的，为什么第二张图的FITC和Bv510这么飘？而且分团不如之前那么清楚？当时上样本的时候就发现这个问题了，但是怎么调整，洗机器，也没办法改变，所以只能收了。想请问老师们，如果我想做动态比较，现在很明显不可以使用同一个门了，那我是否还能进行比较?
3. 还有就是做MDSC细胞，只圈7AAD的阴性部分会导致没有MDSC细胞，对各个位置进行了反设门。发现CD11b+Gr-1+主要在7AAD阳性靠上的这一团里，已经调过补偿了，这是为什么呢？也不可能只死亡MDSC细胞吧？ 烦请各路大神解答一下。

niwanmao

1和2的问题，可能会与仪器状态有关，你这台仪器使用时间、日常保养和维护是怎么样的。目前从图形看，这样的分布，是问题不大的，你到时候不用十字门，而是分别用不规则门圈CD4+和CD8+的信号即可，因为分群非常好，不用担心。

至于3这个问题，其实你后面圈的7-AAD弱表达部分，是可以圈进去的，只有7-AAD高表达的那部分才是肯定死亡的。

半年y

niwanmao 发表于 2021-1-26 08:11
1和2的问题，可能会与仪器状态有关，你这台仪器使用时间、日常保养和维护是怎么样的。目前从图形看，这样的 ...

十分谢谢老师，感谢老师的回答。老师您可以看到，7AAD在FSC-H上分上下两团，我反设门了下面这一团发现基本上是斜角细胞，请问老师这群还需要圈吗？

niwanmao

半年y 发表于 2021-1-26 19:34
十分谢谢老师，感谢老师的回答。老师您可以看到，7AAD在FSC-H上分上下两团，我反设门了下面这一团发现基 ...

SSC过小的（小于淋巴细胞），无论7-AAD强弱，都不要。

半年y

niwanmao 发表于 2021-1-26 20:52
SSC过小的（小于淋巴细胞），无论7-AAD强弱，都不要。

好的 谢谢老师