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[图片] 人外周血Treg细分亚群的设门分析和正常范围

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发表于 2021-1-29 19:15:31 | 显示全部楼层 |阅读模式

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设门
Snipaste_2021-01-29_16-17-13.png
(A-C)淋巴细胞按大小和颗粒度设门,排除粘连体,圈活的CD4+T细胞。
(D)调节性T细胞(Treg)鉴定为CD4+CD25HighCD127 low(红门),其余细胞鉴定为“非Treg”T细胞(蓝门)。
(E&F)细胞经固定和特殊破膜后,进行FOXP3染色。
在(E)中,虚线表示CD25阴性、弱和高表达的定义。
在(F)中,相对于Treg FOXP3 FMO对照(纯灰色),显示了CD4+ CD25High CD127lowTregs(红线)和非Tregs(蓝线)中的FOXP3表达,图示中显示了平均荧光强度(MFI)值。
(G和H)Memory Tregs和Memory Non-Tregs表型均为CD45RA-CD45RO+。
根据CXCR3、CCR4和CCR6的表达,(I-N)Treg和Non Treg Th亚群定义如下:Th17(CXCR3-CCR4+CCR6+)、Th1(CXCR3+CCR4-CCR6-)、Th17.1(CXCR3+CCR4+CCR6+)和Th2(CXCR3-CCR4+CCR6-)。


正常参考范围
2021-01-29_19-13-17.png


节选自:Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur. J. Immunol. 2019. 49: 1457–1973

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发表于 2021-2-18 18:09:56 | 显示全部楼层
倪老师您是用什么软件分析的?
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 楼主| 发表于 2021-2-18 18:54:51 | 显示全部楼层
开心小松鼠 发表于 2021-2-18 18:09
倪老师您是用什么软件分析的?

上面这个图是文章里的。
我自己平时分析临床样本用Kaluza比较多,后续会改用自己编写的“流式智子”软件上实现自动化分析。
有时候会用免费的Flowing。
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发表于 2021-2-19 14:55:07 | 显示全部楼层
本帖最后由 开心小松鼠 于 2021-2-19 16:44 编辑
niwanmao 发表于 2021-2-18 18:54
上面这个图是文章里的。
我自己平时分析临床样本用Kaluza比较多,后续会改用自己编写的“流式智子”软件 ...

支持,希望 流式智子能够尽快普及
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发表于 2023-4-10 20:22:23 | 显示全部楼层
倪老师,CD8+的Treg也可以用CD25和CD127标记吗?我看有的文章是CTLA4,可以用CD25和CTLA4直接标记所有的Treg吗
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 楼主| 发表于 2023-4-10 21:29:20 | 显示全部楼层
W3YC 发表于 2023-4-10 20:22
倪老师,CD8+的Treg也可以用CD25和CD127标记吗?我看有的文章是CTLA4,可以用CD25和CTLA4直接标记所有的Tre ...

CD8+ Treg 细胞主要以 CD45RO 表达为特征,缺乏 CD28、CD62L 或 CD122 表达, Foxp3 呈异质性。
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发表于 2023-4-11 20:27:25 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-4-10 21:29
CD8+ Treg 细胞主要以 CD45RO 表达为特征,缺乏 CD28、CD62L 或 CD122 表达, Foxp3 呈异质性。
...

谢谢倪老师!
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发表于 2023-4-19 12:08:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-4-10 21:29
CD8+ Treg 细胞主要以 CD45RO 表达为特征,缺乏 CD28、CD62L 或 CD122 表达, Foxp3 呈异质性。
...

倪老师,如果按照CD4+CD25+CD127-的方式来分析CD8的Treg,从CD8+细胞里面设门出来,同时看CD25+CD127-,几乎是没有阳性的吗?
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 楼主| 发表于 2023-4-19 20:37:24 来自手机 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2023-4-19 12:08
倪老师,如果按照CD4+CD25+CD127-的方式来分析CD8的Treg,从CD8+细胞里面设门出来,同时看CD25+CD127-, ...

做CD8 Treg,还是用foxP3吧
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