FITC单染时需要调荧光补偿吗

ruyudeshui · 发表于 2011-5-9 20:23:26

FITC单染调荧光补偿后

FITC单染没有调补偿

我做的用一抗与细胞表面蛋白结合，然后FITC标记二抗与一抗结合，在上机检测时需要调节荧光补偿吗？我的这两种结果哪个是正确的？非常感谢！

niwanmao · 发表于 2011-5-9 20:23:27

ruyudeshui 发表于 2011-5-9 20:23

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我做的用一抗与细胞表面蛋白结合，然后FITC标记二抗与一抗结合，在上机检测时需要调节荧光补偿吗？我的这两 ...

你这两组图片是同一个标本吗？如果是同一个标本不可能会相差这么大吧。

一般是不需要调节补偿的，因为你就检测一个指标，其它通道没有荧光漏到FITC这边来，而FITC即使漏到别的通道也无所谓。

ruyudeshui · 发表于 2011-5-11 21:28:17

本帖最后由 ruyudeshui 于 2011-5-11 21:31 编辑

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谢谢您的指点，这两个图片中date 002与011是同一个样品的检测结果，只是调节的仪器条件不一样，002没有调补偿，而011调补偿了。也就是说单染时不需要调荧光补偿对吗？

niwanmao · 发表于 2011-5-11 21:38:20

ruyudeshui 发表于 2011-5-11 21:28

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谢谢您的指点，这两个图片中date 002与011是同一个样品的检测结果，只是调节的仪器 ...

是的，单染时，把其它通道的电压调节到最低（约为150），补偿就不需要设置了。

ruyudeshui · 发表于 2011-5-12 19:05:56

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哦，这样我就知道了，谢谢！

chujindong · 发表于 2011-9-5 15:36:34

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为什么其他通道还要调节电压呢？150是最低的？难道是机器不一样，我们的仪器可以调到0。

niwanmao · 发表于 2011-9-5 15:44:59

chujindong 发表于 2011-9-5 15:36

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为什么其他通道还要调节电压呢？150是最低的？难道是机器不一样，我们的仪器可以调 ...

不调节也可以，但我觉得如果把其它通道电压调到最低可以最大限度的防止干扰，你可以试试在FITC单染时把PE通道的电压调到最低和最高，图形上有什么区别。

电压最低值跟机器应该不一样的，我的CALIBUR是150最低。

chujindong · 发表于 2011-9-5 15:55:01

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好的，以前没注意，下回试试。

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