Treg 以及CD4绝对计数

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-17 20:23:16

请教各位大神，我现在流式已经跑完了，投文章，审稿人要求比较CD4和Treg的绝对计数。文章只给了百分比，疑惑的是为啥一定要给绝对计数？
Treg在组织中的绝对计数和百分比的意义？

第二，FlowJo 有一个功能可以在原有FCS数据的基础上导出一个新的FCS数据。利用此功能将所有的FCS数据导出为含有相同细胞数目的样本，在这样的条件下直接比较细胞数目，算不算就是绝对计数结果了？因为看到一些帖子说要微球法，体积法检测比较绝对数啥的？

非免疫专业出身，劳驾各位大神解答。万分感谢。

niwanmao · 发表于 2021-3-17 20:45:09

1、如果是组织的话，是无法做绝对数的，因为组织不像血液、体液，多少体积是明确的，组织解离成单细胞悬液后的体积是有主观性的。
这一点可以跟评审说明。
2、做绝对计数，是必须要有绝对计数微球的。当然，体积法也可以的，体积法的话，是机器的功能，不是你自己测量好体积，再去获取细胞总数，因为这样的话，你如何保证你获取了完整的所有细胞？有部分流式细胞仪是自带体积法绝对计数功能的。

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-17 21:48:48

感谢老师的回复，确实是组织样本。很好的解决我的问题，懂得了。万分感谢

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-17 21:59:01

BD-FACS Celesta 这台仪器没有绝对计数功能吧老师，我没听到说有这个功能过

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-17 22:17:50

niwanmao 发表于 2021-3-17 20:45
1、如果是组织的话，是无法做绝对数的，因为组织不像血液、体液，多少体积是明确的，组织解离成单细胞悬液 ...

还有疑问，请教老师，如果是脾脏这种组织，怎么能做绝对计数呢？先称重，调整浓度一致，然后要么加微球上机？要么是用带体积法的流式仪上机？不知道我理解有错没. 万分感谢！

niwanmao · 发表于 2021-3-18 07:54:55

咆哮的小清新发表于 2021-3-17 22:17
还有疑问，请教老师，如果是脾脏这种组织，怎么能做绝对计数呢？先称重，调整浓度一致，然后要么加微球上 ...

是的，以N*10E6/g 这样的形式表示可能会好一些。

wwh123456 · 发表于 2021-3-18 09:29:41

第一个问题：细胞比例增加并不能真实反映细胞的增殖分化情况，有可能是其他细胞的比例下降更明显导致的。所以提供绝对细胞计数更具有说服力。

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-18 10:14:56

wwh123456 发表于 2021-3-18 09:29
第一个问题：细胞比例增加并不能真实反映细胞的增殖分化情况，有可能是其他细胞的比例下降更明显导致的。所 ...

感谢解答，最近学习了一些，懂了，感谢感谢

咆哮的小清新 · 发表于 2021-3-18 10:20:03

niwanmao 发表于 2021-3-18 07:54
是的，以N*10E6/g 这样的形式表示可能会好一些。

好的，懂得了老师非常感谢

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