RA患者外周血淋巴细胞CD3标不上，求解。

一成天

    上周五，本人对临床诊断为类风湿性关节炎的一个住院患者进行外周血T细胞亚群分析，
用的是BD的四色淋巴细胞亚群分析试剂（3/8/45/4），仪器为BD FACSCalibru，结果上机时发现，
以CD45/SSC设淋巴细胞门，FL1通道，没有荧光（CD3不表达），但是CD4和CD8均有较强表达。
这样就出现了CD3-/CD4+和CD3-/CD8+的两群细胞。
   为了排除试剂加错，第二日又重测该标本，结果仍如此。
   用PBS对外周血标本进行洗涤后，再重新加试剂上机检测，CD3旋即可以测出来。

  不知有没有遇到这种情况的老师，给在下指教下。
（个人比较倾向于RF封闭了表面CD3位点而导致单抗无法与之结合，但是为什么其他类风湿性关节炎的病人都没有这种现象呢），

niwanmao

一成天 发表于 2011-5-11 21:54

                               
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这个病人，今日重新送来复查，结果同前次一样，都是PBS洗涤后才显示CD3，
血生化大部正常，ALT稍高，胆红 ...

查了下资料，有报道过RA的病人CD3表达偏低，认为与患者的粒细胞粘附或巨噬细胞有关。http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ ... df/cei0120-0174.pdf
如此说来应该不是个例，你可以注意比较一下其它病人的结果，同一批做个正常人的标本对照看，不单单看CD3的表达率，同时注意它的荧光强度。可能会有较多的病人荧光强度降低，我们没有注意到。

niwanmao

一成天 发表于 2011-5-11 21:07

                               
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上周五，本人对临床诊断为类风湿性关节炎的一个住院患者进行外周血T细胞亚群分析，
用的是BD的四色淋巴 ...

这种情况我还只在LAMBDA、KAPPA轻链和胞膜IgM的检测中碰到过，因为这几类容易受血清中的游离分子的影响，但对于CD3这类表达非常高的分子，我还真没碰到过。
可以尝试跟踪这个病人看，下次的标本是否还是如此，或者是否跟他的病情有关？另外查查他的血生化指标和蛋白电泳等结果。

一成天

niwanmao 发表于 2011-5-11 21:43

                               
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这种情况我还只在LAMBDA、KAPPA轻链和胞膜IgM的检测中碰到过，因为这几类容易受血清中的游离分子的影响， ...

这个病人，今日重新送来复查，结果同前次一样，都是PBS洗涤后才显示CD3，
血生化大部正常，ALT稍高，胆红素正常。血脂正常 ，类风湿因子稍高，具体值记不得了。
蛋白电泳没有做过，明天拿去跑下看看。顺便看看他的病例用药情况等

sugarswallow

1. 我觉得同时可以做一个正常人或者其他病的病人的外周血作对照，如果只是增加洗涤步骤后就可以显示出来，那不能说这个分子不表达或者低，有可能有干扰因素影响血液标本的检测。
2.更换其他强荧光（PE或APC）的CD3抗体，看看是否还有此现象发生，不一定用cocktail？
3.不但看表达率，还看MFI
4.其实按你的结果说细胞是存在的，只是不适合全血不洗涤法？