补偿调节相关问题

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-15 17:31:41

请教一下大家关于流式补偿的问题，激发光不同一般不会存在补偿，发射光存在重叠就会有补偿，不知道这样理解对不对？有如下几个通道（TITC, PE, PE-TR, PerCP, PE-cy7, APC, APC-cy7），如果全染的话，那么哪几个通道之间会存在荧光补偿呢？

niwanmao · 发表于 2021-4-15 17:31:42

FITC、PE两个之间

PE、PE-TR、PerCP、PE-cy7这四个之间

APC、APC-cy7两个之间

PE-cy7和APC-cy7

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-16 09:38:22

”PE、PE-TR、PerCP、PE-cy7这四个之间“是指这四个之间的任意两个都存在补偿吗

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-16 09:38:51

niwanmao 发表于 2021-4-15 21:51
FITC、PE两个之间

PE、PE-TR、PerCP、PE-cy7这四个之间

”PE、PE-TR、PerCP、PE-cy7这四个之间“是指这四个之间的任意两个都存在补偿吗

niwanmao · 发表于 2021-4-16 11:02:26

荷兰西瓜发表于 2021-4-16 09:38
”PE、PE-TR、PerCP、PE-cy7这四个之间“是指这四个之间的任意两个都存在补偿吗 ...

对。

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-16 18:05:20

niwanmao 发表于 2021-4-16 11:02
对。

倪老师我还有一个问题，就是PE-cy7和APC-cy7是由两个不同的激发光激发，为什么这两者之间也存在补偿呢？

niwanmao · 发表于 2021-4-17 09:13:24

荷兰西瓜发表于 2021-4-16 18:05
倪老师我还有一个问题，就是PE-cy7和APC-cy7是由两个不同的激发光激发，为什么这两者之间也存在补偿呢？ ...

最后的发射光，都是cy7发出，虽然最后的滤光片也不在一起，但还是存在一定的荧光渗漏。

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-17 12:50:53

niwanmao 发表于 2021-4-17 09:13
最后的发射光，都是cy7发出，虽然最后的滤光片也不在一起，但还是存在一定的荧光渗漏。 ...

还有就是关于“PE、PE-TR、Percp、PE-cy7这四个通道之间的任意两个都存在补偿”，可是有的通道之间的滤光片并不在一起，比如PE和PE-cy7的滤光片，他们存在补偿是因为发射光相同吗？FITC也是488的发射光，为什么FITC只跟PE有补偿，跟其他通道没补偿呢？

niwanmao · 发表于 2021-4-18 10:17:57

荷兰西瓜发表于 2021-4-17 12:50
还有就是关于“PE、PE-TR、Percp、PE-cy7这四个通道之间的任意两个都存在补偿”，可是有的通道之间的滤光 ...

FITC和PE是488nm激发，不是发射。
其实你去看一下spectrum viewer，看各荧光素的激发光和发射光，就一目了然了。

荷兰西瓜 · 发表于 2021-4-18 13:47:31

niwanmao 发表于 2021-4-18 10:17
FITC和PE是488nm激发，不是发射。
其实你去看一下spectrum viewer，看各荧光素的激发光和发射光，就一目 ...

对488是激发光，当时打错了，谢谢倪老师

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