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悬赏2流星未解决
各位老师好,我近期体外培养了human-PBMC、B细胞、CD8+T细胞,其中B和CD8均是磁珠分选后,加入特异性刺激剂(比如anti-cd3/cd28等)培养。培养后的细胞上流式,发现CD45及下游CD19或者CD8总是分为明显的两群,这让我圈门有些犹豫和困惑。以下以培养后的B细胞上机检测为例。
经过讨论,我个人理解,分的两群,右侧群是确定的CD45或者CD19,左侧群是培养后“要死不死”或者就是死细胞,理由是FSC/SSC图形上左侧群接近细胞碎片的位置。最终圈门,我会只圈最右侧的门。
解决方案:后续加染死活。但是因为死活染料占据荧光通道,只是想尝试一下,后续仍考虑继续“经验”画图。
请老师们指正。谢谢
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培养后细胞分两群
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只圈左侧群
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只圈右侧群,我认可的圈门方式
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