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[标本处理] 肿瘤部位细胞提取

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发表于 2021-5-18 11:19:44 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
流式小白,目前的课题需要用到流式分析T细胞,目前课题组提取肿瘤细胞是直接捣碎然后过滤收集,没有消化。流式上面淋巴细胞的分群不明显,CD4、CD8标记后荧光感觉也分不开,都不知道有没有染上(1.5微染的,细胞量不知道有多少,300微的总体积)通道是BL1和YL1,基本上没有调补偿,想知道问题出在哪。

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发表于 2021-5-18 16:58:12 | 显示全部楼层
抗体用量过少,染色体积过大。所以结果肯定很差。

首先建议一开始的时候,可先用全量,100ul体积先试。如果能做出结果,再进行滴定优化抗体用量。
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 楼主| 发表于 2021-5-18 20:06:32 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-5-18 16:58
抗体用量过少,染色体积过大。所以结果肯定很差。

首先建议一开始的时候,可先用全量,100ul体积先试。如 ...

好的好的,谢谢老师
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发表于 2021-5-20 14:00:09 | 显示全部楼层
可以先用分离液富集一下免疫细胞呀
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发表于 2021-5-29 08:46:06 | 显示全部楼层
感觉还是需要消化,我们消化以后提取的还行,T细胞也能分群
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发表于 2021-5-29 08:47:34 | 显示全部楼层
zxy714142006 发表于 2021-5-29 08:46
感觉还是需要消化,我们消化以后提取的还行,T细胞也能分群

不过我们买的抗体说明书上写的多少微升/test,就直接按照那个量加的
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发表于 2021-9-2 22:19:34 来自手机 | 显示全部楼层
确实需要消化,最好还能配上专用的解离机器,比如美天旎的机子,国产的也行
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