如何验证刺激剂的效果？

汀雅

我在张明霞老师关于《流式细胞术检测Th22/Th17/Th1/Th2/Treg的应用》看到如图所示步骤表示不解，想请教一下各位老师：1.如何去标记胞内和胞外的CD69呢？是两种不同的试剂吗？具体标记方法是怎样呢？
2.刺激剂和阻断剂使用前后胞内和胞外的CD69表达情况是怎么样呢？如何去分析？

niwanmao

1、用的是同一种抗体，只不过胞内的CD69事先进行了固定、破膜处理。
2、刺激之前的CD69表达水平低。

汀雅

niwanmao 发表于 2021-5-31 20:46
1、用的是同一种抗体，只不过胞内的CD69事先进行了固定、破膜处理。
2、刺激之前的CD69表达水平低。 ...

倪老师，您说的第一条的意思是我刺激之后先标记表面CD69，然后做固定破膜后再标记CD69,是这个意思吗？

niwanmao

汀雅 发表于 2021-6-1 09:04
倪老师，您说的第一条的意思是我刺激之后先标记表面CD69，然后做固定破膜后再标记CD69,是这个意思吗？ ...

分开做。表面归表面，另一份样本。
胞内做固定、破膜，再标记。

汀雅

niwanmao 发表于 2021-6-1 11:39
分开做。表面归表面，另一份样本。
胞内做固定、破膜，再标记。

明白了，谢谢老师！