急求裂解红细胞步骤

15955413540 · 发表于 2021-6-2 11:21:04

因为要做人外周血树突状细胞，含量较少，故最近换了裂解红细胞的方法，但是最近几次裂红都不是很好，所以想问一下大家是怎么操作的，我是先裂解再染抗体的，顺便问一下哪种红细胞裂解液好用一点，谢谢！

niwanmao · 发表于 2021-6-2 12:46:37

经典永流传：

氯化铵红细胞裂解液的配制
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-206-1-1.html
(出处: 流式中文网)

15955413540 · 发表于 2021-6-2 13:12:47

谢谢老师，还有就是想问一下倪老师，我这两次裂完之后，最后的上机环节，总是有很多细胞团块沉下去了，震荡的话也不能完全分开，之前用PBMC来做的话就没出现过这种情况，所以想问一下老师，这个情况跟裂红这种方法有关系吗

niwanmao · 发表于 2021-6-2 20:42:32

15955413540 发表于 2021-6-2 13:12
谢谢老师，还有就是想问一下倪老师，我这两次裂完之后，最后的上机环节，总是有很多细胞团块沉下去了，震荡 ...

你用的是不是含固定剂的。换成我前面的这个配方，就没问题。

15955413540 · 发表于 2021-6-2 21:01:45

没有呢，我用的是不含固定剂的，还有就是老师一般裂红的话，上限是裂几次或者多长时间呢，裂解液需不需要恢复至室温？

niwanmao · 发表于 2021-6-3 12:36:00

15955413540 发表于 2021-6-2 21:01
没有呢，我用的是不含固定剂的，还有就是老师一般裂红的话，上限是裂几次或者多长时间呢，裂解液需不需要恢 ...

只要你用10～20倍体积的红细胞裂解液裂解，都应该能裂干净的，如果裂不干净，要么是裂解液失效了，要么就是偶见的样本耐溶。

上限一般两次左右。过多裂解不好。

15955413540 · 发表于 2021-6-3 15:53:40

好的，谢谢倪老师！

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