关于流式抗体滴定

15955413540 · 发表于 2021-6-10 20:41:16

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15955413540 · 发表于 2021-6-10 20:42:15

怎么图片不显示

15955413540 · 发表于 2021-6-10 20:51:23

最近做了滴定，但是不知道哪里出了问题，分群不明显，而且有一种抗体阳性率很低，做了五个梯度，一次是2.5ul，1.25ul，0.63ul,0.31ul,0.16ul/50ul细胞悬液,每种抗体推荐量都是5ul/100ul细胞悬液，考虑到节省抗体，所以细胞悬液减少到50ul,希望大佬们指点一下！

niwanmao · 发表于 2021-6-13 10:31:00

15955413540 发表于 2021-6-10 20:51
最近做了滴定，但是不知道哪里出了问题，分群不明显，而且有一种抗体阳性率很低，做了五个梯度，一次是2.5u ...

主要是选择的样本有关，假如你选择的样本是某个标记全阳的，那么建议混入一些其它阴性的细胞，便于计算信噪比。

15955413540 · 发表于 2021-6-16 20:14:50

不是全阳的，就想问老师如果是那种分群不明显的细胞的话，画门是不是只能根据同型的结果来画门呢

niwanmao · 发表于 2021-6-16 20:50:35

15955413540 发表于 2021-6-16 20:14
不是全阳的，就想问老师如果是那种分群不明显的细胞的话，画门是不是只能根据同型的结果来画门呢 ...

分群不明显，说明选择的细胞不正确，抗体滴定，与细胞种类无关，所以尽量选阳性和阴性能够明显分开的一类或两类细胞混合。

15955413540 · 发表于 2021-6-16 21:45:01

好的吧，倪老师，我今天又做了另两种抗体的滴定，就做了三个梯度，1:5稀释后，加入2ul，4ul,8ul,结果计算染色指数时是依次下降的，想问一下老师是不是说明用较低的抗体就可以了呢？

niwanmao · 发表于 2021-6-17 07:55:43

15955413540 发表于 2021-6-16 21:45
好的吧，倪老师，我今天又做了另两种抗体的滴定，就做了三个梯度，1:5稀释后，加入2ul，4ul,8ul,结果计算染 ...

前面说了这么多，意思就是这样的图形是不适合来计算信噪比的。我不知道你是如何对这些图形进行计算的？

15955413540 · 发表于 2021-6-17 07:59:21

老师是这样的，因为我现在没有别的细胞的标记抗体，所以没有办法从别的细胞里来看，上面的话就是根据染色指数的公式来计算的，根据阴性管定义的阴阳分界的

nikeyia10 · 发表于 2021-6-17 08:54:04

15955413540 发表于 2021-6-17 07:59
老师是这样的，因为我现在没有别的细胞的标记抗体，所以没有办法从别的细胞里来看，上面的话就是根据染色指 ...

可以在染色后加入一部分未染色的细胞充当阴性群

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