组织样本保存问题

aa617126230

老师，您好

        我们这边需要对人创伤组织样本进行巨噬细胞的分析检测，但是收样频率不固，基本每天都有一两例样本，但是实验室没法每天进行来样即检，想询问下可以用组织保存液进行对组织进行统一保存，然后每周统一一天时间进行检测吗。不需要进行刺激，但是需要进行破膜，因为要检测CD203等膜内分子。

niwanmao

1、用多聚甲醛，但建议事先做好比对工作。
2、第2种方法可能有广告，但是是良心推荐的，就是我们流式中文网的原创产品，你可收集组织后，用魔滤魔杵处理成单细胞悬液，然后再按照2ml悬液加入250ul I型保存液，这样一周测一次没问题。魔滤魔杵和保存液链接：https://kdt.im/PhQvsr。也可直接咨询张鸿

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aa617126230

niwanmao 发表于 2021-6-24 15:29
1、用多聚甲醛，但建议事先做好比对工作。
2、第2种方法可能有广告，但是是良心推荐的，就是我们流式中文网 ...

谢谢您，我这边已经和张老师联系好了，还有一个疑问，我看到是有I型和III型保存液之分的，张老师那边回复说I型是关注与细胞保存的和III型可以整块组织进行保存的，这两种解决方案对于后续巨噬细胞的分离有什么需要注意的吗。

1是可以直接用III型保存液直接保存再在后面进行做细胞分离吗？
我这边都是先将组织用胶原酶消化后再在过200目细胞筛，之后再通过Ficoll分离。取中间层进行巨噬细胞分析的。
2是我这边的样本还有一类是冲洗液，离心后都是细胞，这部分细胞可以直接用I型进行保存吗

niwanmao

aa617126230 发表于 2021-6-25 09:25
谢谢您，我这边已经和张老师联系好了，还有一个疑问，我看到是有I型和III型保存液之分的，张老师那边回复 ...

1、I型和III型保存后的样本，都不适合分离、培养。只适合直接制成单细胞悬液检测。酶消化后，建议直接标记抗体检测，并用死活染料区分死活。ficoll分离，对于检测，是没有必要的。
2、冲洗液，是可以直接在I型保存的，比例是2ml冲洗液+250ul I型保存液。

aa617126230

niwanmao 发表于 2021-6-26 08:46
1、I型和III型保存后的样本，都不适合分离、培养。只适合直接制成单细胞悬液检测。酶消化后，建议直接标 ...

好的，明白了，谢谢您的指点

cczxgysl

niwanmao 发表于 2021-6-26 08:46
1、I型和III型保存后的样本，都不适合分离、培养。只适合直接制成单细胞悬液检测。酶消化后，建议直接标 ...

老师您好，1.请问如果肿瘤组织淋巴细胞比较少，肿瘤细胞多，消化完以后我先过ficol是不是可以把淋巴细胞富集起来，有利于后面的检测？2. 另外请问死活一般都是要染吗？如果不做的话对研究免疫细胞影响大吗？谢谢！

xeeloij

可以提出巨噬细胞，然后用细胞冻存液冻起来，一批复苏染色上流式

niwanmao

cczxgysl 发表于 2021-12-9 09:46
老师您好，1.请问如果肿瘤组织淋巴细胞比较少，肿瘤细胞多，消化完以后我先过ficol是不是可以把淋巴细胞 ...

如果希望能够研究的细胞种类完整一些，不建议用Ficoll，因为容易丢失很多种类的大细胞（如巨噬、中性粒等）。
死活一般都是要染的，因为组织处理时不可避免产生死细胞，去掉之后，获得的数据结果相当会更稳定一些。