ROS检测探针与固定透化不兼容的问题

小米-mihray

各位老师好，我想看人外周血Th17细胞群中ROS的表达量，因此，我先分离出PBMC，再用PMA\Ion\BFA 37℃孵育4个小时，再标记CD4及活性氧检测探针H2DCFDA,再对细胞进行固定破膜后标记相关胞内抗体，最后上流式发现，ROS几乎无发检测到。在查找原因的过程中发现，ROS检测探针H2DCFDA无法与固定透化兼容。

所以想请教一下，如果就想在PBMC中去看Th亚群中活性氧水平，是否有方法检测到。可以避免这种不兼容的问题。

试剂商推荐用另一种检测探针cellrox grenn,说可以与固定透化兼容，但是相关文献报道太少。

niwanmao

如果做人外周血，是完全可以用表面标记来做的，Th17可用CD3、CD4、CXCR3、CCR6圈出Th17。这样就能与ROS探针共染了。

小米-mihray

niwanmao 发表于 2021-7-27 15:18
如果做人外周血，是完全可以用表面标记来做的，Th17可用CD3、CD4、CXCR3、CCR6圈出Th17。这样就能与ROS探针 ...

好的，非常感谢您的回复。