CD3染色问题

star1016

各位战友，之前完全没做过流式，现在准备用流式检测一个药物对Treg、NK、CD8+细胞亚群的增殖情况，PBMC的激活本来打算省事直接用Immunocult（一种CD3、CD28抗体复合物），但是看到他的说明书里显示用了这个激活T细胞就不能进行CD3染色了。因为对流式不是很了解，想知道这种活化后不能染色的情况是只限于这种试剂吗？用anti-CD3包板或用anti-CD3的微球会不会也有这个问题呢？
说明书见附件
谢谢各位！

闷油瓶

包板应该不会存在这个问题吧，主要是你刺激完后多长时间测流式？如果一周之内就做，还是有影响的可能

niwanmao

这种抗体复合物是可溶性的，所以可能会影响CD3的结合。
包板不会影响，微球的话我记得还可以洗脱的。可溶性的话，可能解决方案只有两个：
1、设门改成反向，即用CD56、CD19、CD45，圈淋巴细胞区域 ，排除B和NK来圈T细胞。
2、可咨询一下对方公司，他们所用的CD3抗体结合位点，然后找一个不同结合位点的CD3抗体，去检测。