关于Ki67染色问题

刘小六

大家好，我最近检测共培养之后目的细胞的Ki67出现一个很严重的问题：单阳管Ki67染上了，但是样本管（多了3个表面marker）Ki67已经两次都是阴性结果，请问有朋友遇到一样的情况吗？这是什么原因呢？
附图：单阳管和隐形管

niwanmao

两管的处理步骤？

刘小六

niwanmao 发表于 2021-8-30 11:04
两管的处理步骤？

倪老师您好，步骤是：收集人外周血-裂红-PBS洗-染胞外抗体（样本管和单阳管阳性都没有问题）-加入破核膜破膜液（用的是Invitrogen的破膜液，先加1:3配置的固定液1h后加入破膜液离心）-染胞内抗体Ki67。共培养试验做了3次，第二次和第三次都是单阳管Ki67分群了，样本管就是我发的图里的那个样子。今天刚做了第四次，周三检测

niwanmao

刘小六 发表于 2021-8-30 17:38
倪老师您好，步骤是：收集人外周血-裂红-PBS洗-染胞外抗体（样本管和单阳管阳性都没有问题）-加入破核膜 ...

那么那三个表面标记，分群是如何的？尽可能把父级门都放出来一起对比一下。