人PBMC中检测Treg

xiaolong822 · 发表于 2021-8-30 15:02:36

如题，最近在做间充质干细胞对PBMC中免疫调节功能实验，用PMA+离子霉素刺激PBMC后（无BFA，因为是CD4CD25CD127），出来的流式图不太好，请大神指导。

niwanmao · 发表于 2021-8-30 20:36:36

原始数据打开来，只能看到FL1、FL2、FL3等，看不到抗体名称。
从你这里的图看，分群不是挺好的吗？

xiaolong822 · 发表于 2021-8-31 14:14:12

niwanmao 发表于 2021-8-30 20:36
原始数据打开来，只能看到FL1、FL2、FL3等，看不到抗体名称。
从你这里的图看，分群不是挺好的吗？ ...

FL1是CD4-FITC FL2是CD25-PE FL5是CD127-PECY7，但是结果是CD4+CD25+CD127-的细胞非常非常少，我想问我的电压补偿，设门等是不是需要调整。

qian倩 · 发表于 2021-9-6 11:47:00

感觉分群不好主要原因是CD25和CD127抗体荧光素的选择原因

xiaolong822 · 发表于 2021-9-6 15:18:18

qian倩发表于 2021-9-6 11:47
感觉分群不好主要原因是CD25和CD127抗体荧光素的选择原因

PE和PE-CY7比较强吧

刘小六 · 发表于 2021-9-8 08:47:36

我有一个小师妹做人外周血的Treg也是染不出来，PerCP-CD25和PE-Foxp3都染不出来，一直怀疑她是不是补偿调过度了，但是原始数据也看着好少

archerliang · 发表于 2021-9-15 16:45:29

楼主找到原因了吗，我们马上要做还没做，留个痕迹学习一下

niwanmao · 发表于 2021-9-15 21:03:18

archerliang 发表于 2021-9-15 16:45
楼主找到原因了吗，我们马上要做还没做，留个痕迹学习一下

前面不是说了吗，楼主的分群没有问题。

范晋波 · 发表于 2021-9-23 09:55:39

跟倪老师说的一样，染色分群都没有问题，但是实验条件补偿PC7-PE补偿的问题才导致你的分群不是特别明显（第一个图），另外CD127的画门尽量别用十字门，用多边形画右下角一群细胞看比例即可。

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[淋巴细胞亚群] 人PBMC中检测Treg