胞内刺激后的淋巴细胞门

kepler · 发表于 2021-10-9 20:31:08

请教一下大家，梯度分离小鼠脾脏淋巴细胞，用PMA+IONO刺激、破膜，这样的话圈P1淋巴细胞门是不是和不破膜的淋巴细胞门不一样？破膜后的图像如下（不好意思不是很清晰），我圈的P1淋巴细胞门是正确的么？如果错的话是怎么圈呢？谢谢

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niwanmao · 发表于 2021-10-11 07:28:57

组织样本中分离的细胞，尽可能加死活鉴别染料。
如果没有加，至少也要有特异性CD分子（如CD3）反设门，看一下淋巴细胞所在位置。

kepler · 发表于 2021-10-11 11:54:34

niwanmao 发表于 2021-10-11 07:28
组织样本中分离的细胞，尽可能加死活鉴别染料。
如果没有加，至少也要有特异性CD分子（如CD3）反设门，看一 ...

谢谢倪老师，这个是调补偿时候的图
那么在用空白管调电压时，我要怎么确定破膜后的淋巴细胞门呢？可以和未破膜前的一样么？

niwanmao · 发表于 2021-10-11 12:49:37

kepler 发表于 2021-10-11 11:54
谢谢倪老师，这个是调补偿时候的图
那么在用空白管调电压时，我要怎么确定破膜后的淋巴细胞门呢？可以和 ...

未破膜时候的细胞调节好电压，后续可根据破膜的影响，对FSC和SSC进行微调，但其它荧光通道电压不建议调节。

kepler · 发表于 2021-10-11 20:32:53

niwanmao 发表于 2021-10-11 12:49
未破膜时候的细胞调节好电压，后续可根据破膜的影响，对FSC和SSC进行微调，但其它荧光通道电压不建议调节 ...

谢谢倪老师~

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[结构和原理] 胞内刺激后的淋巴细胞门