直标和间标同时标记时的步骤(续）

jingweis530

上传图和数据给老师看看，请老师多指教，谢谢！

niwanmao

jingweis530 发表于 2011-6-9 17:47

                               
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上传图和数据给老师看看，请老师多指教，谢谢！

看了，做图最好是做成直方图。
我认为原因在于你同型对照的做法上，同型对照应该选择一抗的同型对照（如mouse IgG1），然后其标记步骤跟CD25一样。
例如管1是同型对照，那么就先加入Mouse IgG1，孵育15分钟，洗涤1－2次，然后加入二抗，孵育15分钟，裂解红细胞，洗涤1－2次。而不是象你所描述的那样只加入二抗。

jingweis530

谢谢老师，我想问问老师以后我们做间标的话，都需要这样来做同型对照吗？还是针对这次间标和直标因为是同属抗体的原因。因为我们平时做同型对照都是单加二抗这样做的。

niwanmao

jingweis530 发表于 2011-6-13 10:18

                               
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谢谢老师，我想问问老师以后我们做间标的话，都需要这样来做同型对照吗？还是针对这次间标和直标因为是同属 ...

单加二抗这种做法是不正确的。
同型对照的一抗＋二抗，这种做法是标准的做法。可以只做一次，后面几次不做问题也不大，基本上变化不会很大。

jingweis530

谢谢老师！万分感谢！