关于淋巴结及脾脏中T细胞CD44 CD62L的疑问

Climber · 发表于 2021-11-24 19:44:37

各位老师好，近期我在分析淋巴结及脾脏中CD4SP CD8SP细胞CD44 CD62L分群时，怪的是我的分群总会有一群CD44 CD62L DN的细胞群，很是不解，希望老师们能够解答，先前分析可能CD44的抗体稀释比例太高，本次实验缩小了抗体比例，但效果仍不佳

Climber · 发表于 2021-11-26 14:38:35

初步怀疑为冻存后37摄氏度水浴复苏后导致CD62L部分降解，本次采用新鲜的的淋巴结和脾脏细胞，全程4摄氏度处理，可得到正常的外周T细胞发育分群图AA

niwanmao · 发表于 2021-11-24 19:44:38

Climber 发表于 2021-11-26 14:40
我这边找到的原因是温度问题导致CD62L的部分降解，通过新鲜的脾脏、淋巴结全程4℃处理后可获得正常的分群 ...

冻存确实有时候会影响一些特殊标记。

Climber · 发表于 2021-11-24 19:46:19

本帖最后由 Climber 于 2021-11-24 19:52 编辑

本次细胞为冻存后复苏细胞

Climber · 发表于 2021-11-24 19:46:48

本帖最后由 Climber 于 2021-11-24 19:52 编辑

冻存复苏的细胞同时也有大量的死细胞，各位老师将就看哈，非常抱歉

半年y · 发表于 2021-11-24 23:55:39

同问，我也经常出现这样的情况。而且我的还是新鲜制备的脾脏细胞

niwanmao · 发表于 2021-11-25 09:16:07

这些应该算Effector T

Climber · 发表于 2021-11-25 13:22:55

niwanmao 发表于 2021-11-25 09:16
这些应该算Effector T

嗯，但是标准的Effector T cell应该是CD44hi 但是我的分群CD44lo 但我没有找到具体的原因

Climber · 发表于 2021-11-26 14:40:18

半年y 发表于 2021-11-24 23:55
同问，我也经常出现这样的情况。而且我的还是新鲜制备的脾脏细胞

我这边找到的原因是温度问题导致CD62L的部分降解，通过新鲜的脾脏、淋巴结全程4℃处理后可获得正常的分群图，帖子内有我刚做的结果

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