人外周血PBMC的 MDSC圈门问题

如果有人呼唤

各位老师好，我是打算用CD11b，CD33，HLA-DR圈出MDSC，然后再利用CD14和CD15圈出M-MDSC和G-MDSC，但是为什么圈出MDSC之后，M-MDSC和G-MDSC的分群很不明显呢？另外，请各位老师帮忙看看图上的P5是否就是MDSC。谢谢大家！

niwanmao

如果有人呼唤 发表于 2021-11-27 13:35
还有个问题想请教您，我这里的CD14/CD15是不是最好做一下同型？因为分群不是很明显。 ...

CD14有单核作为阳性对照，淋巴作为阴性对照，分群没问题。
CD15之所有未见阳性，是因为你这里没圈中性粒细胞。

niwanmao

G-MDSC可圈这里：



M-MDSC的话，可直接用CD14/HLA-DR，圈CD14++而HLA-DR阴性的部分。

如果有人呼唤

niwanmao 发表于 2021-11-26 21:06
G-MDSC可圈这里：

谢谢倪老师！我看您分享在别的帖子里的nature communications上的讲MDSC的一篇文献（https://www.nature.com/articles/ncomms12150#f1），提到M-MDSC最少标记为CD11b+ CD14+ HLA-DR low/- CD15-，如下图。请问老师仅用CD14+ HLA-DR- 圈M-MDSC够不够呢？周围几乎没有可以请教的人，还请老师不吝赐教，谢谢！

如果有人呼唤

https://www.nature.com/articles/ncomms12150/tables/1

niwanmao

如果有人呼唤 发表于 2021-11-26 23:38
谢谢倪老师！我看您分享在别的帖子里的nature communications上的讲MDSC的一篇文献（https://www.nature. ...

你可以试一下就知道了，因为CD14+的细胞，CD11b本身肯定++的，所以两者有重叠性的，可以理解为统计学上的共线性，所以表型可以这么描述，实际上的设门，可以跳过11b。当然，你要圈进去也是可以的，结果肯定是一样的。

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niwanmao 发表于 2021-11-27 09:12
你可以试一下就知道了，因为CD14+的细胞，CD11b本身肯定++的，所以两者有重叠性的，可以理解为统计学上的 ...

谢谢老师的解答！还想请问老师图片中的CD14-CD15-可否认为是e-MDSC？还是需要用CD123来排除掉嗜碱性粒细胞？（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7269807/）

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还有个问题想请教您，我这里的CD14/CD15是不是最好做一下同型？因为分群不是很明显。

如果有人呼唤

niwanmao 发表于 2021-11-27 19:33
CD14有单核作为阳性对照，淋巴作为阴性对照，分群没问题。
CD15之所有未见阳性，是因为你这里没圈中性粒 ...

谢谢倪老师，收获很多。

如果有人呼唤

niwanmao 发表于 2021-11-26 12:20
CD14有单核作为阳性对照，淋巴作为阴性对照，分群没问题。
CD15之所有未见阳性，是因为你这里没圈中性粒 ...

老师，您说未出现CD15阳性是没有圈中性粒细胞，可是PBMC里面应该没有中性粒细胞吧。请问老师，CD15在单核细胞也表达吗？那为什么我这里的图看不到CD15阳性呀？是不是我阴阳性分界不对，我没有用FMO来界定一下。