鞘液聚焦的流式流速问题

Veblen

流式检测时的流速到底是什么呢？
听说是指液流的直径，直径越大流速越快？如果是这样的话，液流越宽，通过的细胞自然会多，但是就不是一个一个细胞通过激发光照射了。
请老师系统解释一下
1.流式的检测速度ul/min的概念，
2.流速增大减小（高速、低速）具体是指什么？真的的高速液流变宽，低速变窄，而其实液体速度一直不变？
很迷惑，请老师解答一下

hezeljgouc

Veblen 发表于 2021-12-14 14:46
谢谢您的解答，终于没明白了一些。另外，我还想问问是否所有的流式都有两套泵的系统，
一个系统用于鞘液 ...

各家的仪器结构不太一样，我也知道的不多。我们这用的BD的传统正压进样的机器，只有一个泵，但是在后边有几个压力阀门，分别控制鞘液和样本流。有一些机器，通过蠕动泵或者注射泵进样的，可能鞘液和样本是两套独立的泵控制。具体可以咨询一下工程师

niwanmao

讲不了太细，流速越快，在流体上面会增宽，鞘液包裹的细胞，就越有形成湍流的可能性。所以对于精度要求较高的单细胞结果（如绝对计数、倍体等），需要低速获取。

hezeljgouc

这是流体聚焦系统的特性，鞘液包裹着样本流（在中心，很细），液体流动速度取决于鞘液的压力，一般是不变的不然会导致多激光配置的机器信号出问题。你所说的检测速度，一般在10-60 μl/min范围，在机器上应该是flow rate，表示为events/s,，可以用机器上的低速（low run）或高速（high run)按钮控制，这个参数是通过改变样本流的压力实现的，高速上样会导致中心的样本流变宽（或变粗），可能会导致细胞偏离激光光斑的中心，影响检测信号均一性（CV变大），或者像你说的导致两个或多个细胞紧挨着通过激光束（仪器不能区分，也就是粘连细胞变多）

Veblen

hezeljgouc 发表于 2021-11-30 12:09
这是流体聚焦系统的特性，鞘液包裹着样本流（在中心，很细），液体流动速度取决于鞘液的压力，一般是不变的 ...

谢谢您的解答，所以我可以这样理解吗？
1. 鞘液的流动速度一般是不变的，不管在什么检测速度
2. 样本流的速度是通过改变样本流的压力（相对于鞘液流是另一套系统了），来实现细胞通过的激光的速度？
请问是这样理解吗？

hezeljgouc

Veblen 发表于 2021-12-5 22:04
谢谢您的解答，所以我可以这样理解吗？
1. 鞘液的流动速度一般是不变的，不管在什么检测速度
2. 样本流的 ...

鞘液和样本是相对独立的两套压力控制系统，鞘液和样本流的流速主要是由鞘液的压力决定，一般不变，增加样本流压力会使样本流直径变大，所以单位时间检测的样本体积提高，你可以看一下thermo的流式细胞仪原理，说的很清楚
https://www.thermofisher.cn/cn/z ... flow-cytometer.html

Veblen

hezeljgouc 发表于 2021-12-6 15:26
鞘液和样本是相对独立的两套压力控制系统，鞘液和样本流的流速主要是由鞘液的压力决定，一般不变，增加样 ...

谢谢您的解答，终于没明白了一些。另外，我还想问问是否所有的流式都有两套泵的系统，
一个系统用于鞘液的抽吸，另一个泵用于样本的吸取？

Veblen

hezeljgouc 发表于 2021-12-15 09:12
各家的仪器结构不太一样，我也知道的不多。我们这用的BD的传统正压进样的机器，只有一个泵，但是在后边有 ...

好的，谢谢您的解答，理解了。