多发性骨髓瘤MRD：目前的模式、指南和未来的应用

niwanmao

多发性骨髓瘤（MM）是一种浆细胞（PC）恶性肿瘤，通常以一种良性病症开始，称为意义不明的单克隆性丙种球蛋白病（MGUS），并可随着时间推移过渡到明显的浆细胞白血病和髓外骨髓瘤。该病的特征包括血钙浓度升高、肾功能衰竭、贫血、免疫功能受损和溶骨性骨病变。多发性骨髓瘤约占所有癌症的1%，占所有血液学恶性肿瘤的10%。在美国，每年有超过32,000个新病例和13,000个因此而死亡的报告。几十年来，MM的年度年龄调整发病率一直保持稳定，每10万人中有6.5个病例的报告。诊断的中位年龄约为65岁，该疾病很少在30岁以下的人中发现，该年龄组的报告频率为0.02%-0.3%。诱发MM表现的确切病因仍不明确，尽管已经指出了一些风险因素，如职业和环境中的核辐射、石油产品和杀虫剂暴露。多发性骨髓瘤在男性中比在女性中略为常见。非裔美国人的发病率比白种人略高，而亚洲人的风险较低。多发性骨髓瘤通常不被认为是一种遗传性疾病，尽管对高危家族性病例的联系分析证据表明，遗传倾向可能是一个原因。个人有MGUS病史则是一个公认的MM发展的风险因素，每年有1%转化为MM的风险。

为了解MM的生物学和临床方面而进行的日益全面的研究工作，促进了新的方案、药物和治疗方法的发展，从而大大提高了完全缓解（CR）率。因此，需要有更好的策略来检测和定义低水平的疾病，并预测长期结果。传统上，符合CR定义的患者仍然可以通过免疫固定电泳检测到疾病，现在被定义为接近CR（nCR）。 同样，利用血清游离轻链（sFLC）检测可以检测到kappa和lambda的不平衡，这可以作为本来被认为已经达到CR的患者的持续疾病指标。无论采用何种治疗方案，与CR或nCR相比，达到严格CR（sCR）的患者总生存期和无进展生存期明显延长。 治疗期间未被根除的残留肿瘤性PC（也称为可测量的残留病，MRD）的数量可能比例很低，从而不容易被形态学或其它常规技术发现。为了更好地对患者进行分层，已经开发了分子和流式细胞检测MRD的方法，检测灵敏度为0.001%-0.0001%。

MM患者MRD评估的临床意义早有报道，近年来，具有高灵敏度的技术已经被开发和实施。在这方面，传统的分子方法，如实时定量聚合酶链反应（qPCR）和等位基因特异性寡核苷酸实时定量聚合酶链（ASO-qPCR）已被下一代测序（NGS）所取代，而老一代利用七色或更少的流式细胞仪方法已被现在下一代流式细胞仪（NGF）用于评估MM MRD的八色和十色方案所取代。根据国际骨髓瘤工作组公布的最新反应标准，MRD的存在应该用**NGS或NGF**检测，最低检测灵敏度为10E-5（即每10万个细胞中检测到1个异常PC）。虽然NGS和NGF都能提供类似的结果，并且各有优缺点，但MFC一直被证明具有更高的适用性（适用于>95%的患者）、更广泛的可用性、更简单的仪器设置、更短的报告时间（<6小时）、更好的可重复性，并允许定量评估抗原表达水平以进行表型分析。与NGF不同，NGS被认为具有类似或略低的检测水平，可在新鲜或储存的样本上进行，但往往需要诊断样本的序列，使其仅适用于90%的患者。

在基于流式的MRD检测方法能够应用于可靠地评估罕见的骨髓瘤细胞之前，其准确性和检测灵敏度需要进行优化。需要考虑的重要因素包括：
（i）骨髓采集量
（ii）治疗后MRD评估的最佳时间点
（iii）疾病的病灶性质
（iv）骨髓样本的运输和储存条件
（v）用于识别和分离正常与异常PC的抗体组合
（vi）既往用过的基于抗体的免疫疗法
（vii）用于流式细胞仪评估的骨髓细胞的处理
（viii）用于获取数百万事件的流式细胞仪的优化
（ix）数据分析和解释策略

在这里，我们重点讨论样品采集、样品处理、抗体和荧光素的选择、质量控制和建立基于流式MM MRD检测的检测限和定量下限的方法。

游客，本帖隐藏的内容需要积分高于 55 才可浏览，您当前积分为 0

happy_zhang1y

温故知新，学习了，当时看过，但是后来就忘记了。

Yuck

最近在研究MM，学到了。