相同条件下实验组本底荧光显著高于Isotype管是什么原因

ljpshzu · 发表于 2021-12-17 19:29:19

如上图，右图为左图的同型对照，相同补偿电压情况下左图整体为何向右偏移那么多？按照是同型对照圈，阳性就80+了，实际远没有这么多。所以是什么原因？
左图抗体信息：Bio-Human-Fab Jackson 109-066-097
右图抗体信息： Bio-Goat-IgG-Fab Jackson 005-060-006

飞翔 · 发表于 2021-12-20 17:05:13

没有图片呀

niwanmao · 发表于 2021-12-20 18:02:29

1、你的方案搭配上，邻近通道是否对PB有较大的spillover？
2、是否做过阻断？

ljpshzu · 发表于 2021-12-23 11:05:09

niwanmao 发表于 2021-12-20 18:02
1、你的方案搭配上，邻近通道是否对PB有较大的spillover？
2、是否做过阻断？ ...

1.会有一些，但已经调过了
2.未作阻断
补偿电压基本没有太大问题

niwanmao · 发表于 2021-12-23 13:43:27

ljpshzu 发表于 2021-12-23 11:05
1.会有一些，但已经调过了
2.未作阻断
补偿电压基本没有太大问题

荧光渗漏和Fc均会影响整体本底分布。故需进行Fc阻断之后，通过FMO对照确定其界限。

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