死活染料荧光冲突

Panyd · 发表于 2022-1-5 16:02:34

各位老师：
我已用的荧光通道有PE和FITC，我查阅荧光素的光谱，PE与PI、7AAD这类DNA染料有重叠，那我是不是只能用Live/Dead染色呢？还有其他的染料可以选择吗？

bslhk · 发表于 2022-1-5 16:56:12

FL3通道，记得调好调好补偿。

niwanmao · 发表于 2022-1-5 18:02:33

是的。7-AAD可通过调节补偿搭配的。

Live/dead有其它通道可以选，其它商品化的染料很多，可参见：
流式检测，细胞死活还是要先分清的
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6783-1-1.html
(出处: 流式中文网)

Panyd · 发表于 2022-1-6 13:50:03

niwanmao 发表于 2022-1-5 18:02
是的。7-AAD可通过调节补偿搭配的。

Live/dead有其它通道可以选，其它商品化的染料很多，可参见：

好的，谢谢倪老师。那如果7-AAD用PE-Cy5通道，这和PE、FITC的补偿应该怎么调呢？
老师有关于补偿调节技巧的贴吗？

niwanmao · 发表于 2022-1-6 16:01:49

Panyd 发表于 2022-1-6 13:50
好的，谢谢倪老师。那如果7-AAD用PE-Cy5通道，这和PE、FITC的补偿应该怎么调呢？
老师有关于补偿调节技巧 ...

我不知道你们 FITC是什么标记，各做一管FMO（用相应通过阳性样本+阴性样本）。

飞翔 · 发表于 2022-1-7 17:05:23

荧光有重叠很正常呀，正常做好补偿、FMO对照就行了，不影响你使用。不是同一通道的荧光就好了

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[结构和原理] 死活染料荧光冲突