流式补偿如何调节

zhuw · 发表于 2022-1-16 21:40:51

请问网站内的各位大佬，双通道的流式补偿调节的原则是什么呢?我们之前机器培训的时候，工程师的建议是调节各细胞群，使不同细胞群之间横平竖直，但是在调节的过程中，仍然出现细胞群形态偏斜，补偿值调整到很大了依旧没有改善，请问在使用flowjo调节补偿的时候，横纵坐标的参数要如何选择，是线性，log，biex等中间的某一个，还是要根据数据选择合适的值呢？以及调整到何种水平可以认为是调节结果可接受呢？

niwanmao · 发表于 2022-1-17 08:24:45

你是做ROS？这个试验调到这个样子是可以的，只需体现出分群即可。

zhuw · 发表于 2022-1-17 08:52:49

做的是ros(fitc)和尼罗红染色(ecd)的双染，也是第一次做，单染管细胞太少了，没办法调，直接调整一直不太理想，打算这周再重复一下

niwanmao · 发表于 2022-1-17 08:59:36

zhuw 发表于 2022-1-17 08:52
做的是ros(fitc)和尼罗红染色(ecd)的双染，也是第一次做，单染管细胞太少了，没办法调，直接调整一直不太理 ...

这两个通道，补偿应该不大。
不知道你用的是什么机器，电压上做一下优化看看，电压可以影响高MFI位置的Spreading Error，从而最终影响到补偿的调节。

Merci · 发表于 2022-1-17 09:57:43

把FITC的电压调低一点

zhuw · 发表于 2022-1-17 13:41:11

Merci 发表于 2022-1-17 09:57
把FITC的电压调低一点

好的，谢谢，我再试试

zhuw · 发表于 2022-1-17 13:42:14

niwanmao 发表于 2022-1-17 08:59
这两个通道，补偿应该不大。
不知道你用的是什么机器，电压上做一下优化看看，电压可以影响高MFI位置的Sp ...

用的是cytoflex lx，我这周重复实验后，到时候再把结果贴上来

zhuw · 发表于 2022-1-21 18:32:04

重新跑的一次FITC与ECD通道双染（两个通道的增益值均为5）

niwanmao · 发表于 2022-1-22 11:24:23

zhuw 发表于 2022-1-21 18:32
重新跑的一次FITC与ECD通道双染（两个通道的增益值均为5）

这个补偿值和图形可以的啊

zhuw · 发表于 2022-1-24 18:36:26

niwanmao 发表于 2022-1-22 11:24
这个补偿值和图形可以的啊

新手不怎么会判断，之前看到您有个帖子提到log模式和logicle模式验证来验证补偿是否到位也没看懂，您有推荐的补偿调节相关的书籍或者论文吗？
另外我实名论证未通过，也无法发送私信告知，账号一直处在新手区，能先给我开启发短消息的权限吗

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[流式相关软件] 流式补偿如何调节