这个应该怎么画

Yuck

这个怎么画十字门。结果图该是在什么位置。老师三张图帮处理一下，学习一下处理逻辑流程。

LLW0114

为什么不直接截图啊

wxd

你要检测什么？是凋亡还是别的，不说清楚的话，很难给出合适的建议的。

Yuck

wxd 发表于 2022-1-20 13:40
你要检测什么？是凋亡还是别的，不说清楚的话，很难给出合适的建议的。
...

活化。出CD25/CD69的图。做了NC、CD3CD25、CD3CD69、CD32569。怎么把这个FMO应用到32569里。

Yuck

LLW0114 发表于 2022-1-20 11:02
为什么不直接截图啊

老师数据放上了，图我不知道怎么画门，该怎么走逻辑流程，想看看该怎么处理。

Yuck

像25.69这样连续表达，低表达等是不是需要iso对照。

wxd

同型对照的目的是排除细胞表面Fc受体对抗体Fc段的非特异性结合。其实还有一种办法可以排除Fc受体的非特异性结合：用抗体来源的动物血清进行封闭。但是我们做T细胞检测一般很少考虑Fc受体的影响。都是直接以Blank的自发荧光上限为界限画门。

Yuck

wxd 发表于 2022-1-20 16:40
同型对照的目的是排除细胞表面Fc受体对抗体Fc段的非特异性结合。其实还有一种办法可以排除Fc受体的非特异性 ...

谢谢老师。
另外的问题是，左边这个细胞群是什么群呢，不是只圈右边这一群吗。

wxd

在FSC/SSC坐标系里看，左边那一团不像是细胞碎片，从后边那个CD3-FITC/FSC坐标系来看，两团都是T细胞没错。因为这类实验做的比较少，我也不确定那一团是不是要圈起来。你可以结合你的阳性对照组和阴性对照组来确定要不要包含这一团细胞。

tiger

wxd 发表于 2022-1-24 15:16
在FSC/SSC坐标系里看，左边那一团不像是细胞碎片，从后边那个CD3-FITC/FSC坐标系来看，两团都是T细胞没错。 ...

左下角的细胞是未活化的和少量的坏死细胞，应该圈选。做这样的实验，应加一个死活染料，以排除坏死细胞。