肥大细胞免疫表型，以及骨髓实例图

niwanmao

通常，肥大细胞在骨髓中很少见（<1%），在自身免疫和过敏反应时可增高。肥大细胞的胞内颗粒含有大量组胺，故在自身免疫或过敏发挥重要作用。
正常肥大细胞表现出非常典型的免疫表型，具有高 CD117、中等 CD33（类似于单核细胞）、中等 CD9 和 CD71、低 CD38 和 CD11b、低到中等 HLA-DR（低于单核细胞和 B 细胞但高于 T 细胞），且 CD34阴性 、CD19阴性，在CD45/SSC散点图上位于正常嗜酸性粒细胞位置附近（CD45略高于粒细胞）。
根据 2016 年 WHO 造血和淋巴肿瘤分类，CD25 的异常表达（伴或不伴CD2表达）被认为是诊断系统性肥大细胞增多症的次要标准，不过该标准不是肿瘤性肥大细胞的证据，因为这种异常的免疫表型可以出现在化疗后，因此在没有系统性肥大细胞增多症的特征性形态学、分子和临床表现的情况下，应谨慎对待。
肥大细胞由于比例低，故在收集数据时，尽量获取到50万个细胞以上，以确保足够的分析灵敏度。
肥大细胞的颗粒多，因此自发荧光会很强，使得检测容易受干扰，尤其是在由紫色 (405 nm) 和蓝色 (488 nm) 激光（主要是 FITC）激发的通道上。不过，通过CD117高表达的设门是可以很容易圈出来的，因为几乎没有其他细胞具有如此高的 CD117 表达。也正因为存在CD117 的高表达，所以在检测其表面异常表达但强度偏弱的标记时，需充分考虑CD117的荧光渗漏。
下面看几幅实际样本。
1- 骨髓样本（绿色的为正常肥大细胞，蓝色为淋巴细胞）


2- 骨髓样本（绿色为正常肥大细胞）


3- 骨髓样本（绿色为CD25+ 异常肥大细胞）


4- 骨髓样本（绿色为CD2+ 和 CD25+ 异常肥大细胞）


5- 存在KIT D816V突变的骨髓样本（绿色为CD2+ 和 CD25+ 异常肥大细胞）


6- 同时有正常（绿色）和异常（红色）肥大细胞群的骨髓样本


信源：International Clinical Cytometry Society

范晋波

谢谢倪老师分享

happy_zhang1y

老师我做的这群表型像正常肥大的红色细胞CD45/SS不在嗜酸位置，反而在树突位置。

niwanmao

happy_zhang1y 发表于 2022-4-3 16:43
老师我做的这群表型像正常肥大的红色细胞CD45/SS不在嗜酸位置，反而在树突位置。 ...

处理手法上的差异，可能会影响脱颗粒程度，不过你这群的45确实不高，可能是不是仪器间的差异。

happy_zhang1y

niwanmao 发表于 2022-4-3 17:52
处理手法上的差异，可能会影响脱颗粒程度，不过你这群的45确实不高，可能是不是仪器间的差异。 ...

那老师还是觉得这群是肥大细胞哈

happy_zhang1y

我查了一下，肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒都是水溶性的，估计是我的这个样本的肥大细胞颗粒溶于水了。

niwanmao

happy_zhang1y 发表于 2022-4-3 23:16
那老师还是觉得这群是肥大细胞哈

从CD117强度看，还是应该归到肥大细胞。只是一方面是操作手法，一方面是仪器，导致其位置不经典。

happy_zhang1y

今天做的这个肥大的FS和SS典型

niwanmao

happy_zhang1y 发表于 2022-4-5 13:35
今天做的这个肥大的FS和SS典型

这个典型的。