CD99在恶性血液病中的表达

niwanmao

CD99分子简介
CD99于1979年首次被发现，是人类胸腺来源白血病抗原。CD99是一种高度O型糖基化的跨膜蛋白（细胞表面和细胞外的蛋白质是O型糖基化的，其中蛋白质中最丰富的O型糖基化类型是GalNAc通过a型糖苷连接附着在蛋白质链的丝氨酸（Ser）或苏氨酸（Thr）上。CD99由MIC2基因编码，位于人类Y（Yp11-Ypter）和X（Xp22.33-Xpter）染色体的假性自体区（PAR）中。CD99基因编码两种不同的蛋白质：一种是野生型的全长CD99长异构体（CD99 L），有185个氨基酸（分子量为32 kDa）；另一种是截断的短异构体（CD99 S），有161个氨基酸，是选择性剪接的结果（28 kDa）。CD99 S转录本在第8和第9外显子之间有一个18bp的插入，导致一个框内终止密码子，从而产生一个截断的多肽，由此产生的短的异构体与长的异构体有相似的细胞外和跨膜结构域，但在细胞质结构域有差异。

在正常组织中，大家最常知道的是人CD99表达在T细胞，参与了影响T细胞粘附的几个过程，调节T细胞玫瑰花环形成，增加T细胞活化及其与血管内皮细胞的结合。 还通过在白细胞和内皮细胞上表达的CD99的同型相互作用来促进白细胞的分化。 众所周知，CD99还能调节MHC 1类分子的细胞内蛋白转运，并在细胞凋亡和未成熟胸腺细胞的分化中起作用。

在癌症组织中，人类CD99因其在尤文氏肉瘤中的上调而为人所知，是一种诊断性标记。然而，在包括血液恶性肿瘤、骨肉瘤、乳腺癌、胰腺癌、恶性胶质瘤和上皮癌等肿瘤中均存在异常表达，CD99还可作为血液学恶性肿瘤的潜在治疗目标，如急性髓系白血病（AML）和T系急性淋巴细胞白血病（T-ALL）。

克隆号
至少8个克隆号DN16、YG32、12E7、0062、TU12、3B2/TA8、AD20、HO36-1.1，其中三个已知结合位点且能查询到厂家的克隆号详见下图，图中的上下两段蛋白质序列分别是CD99两种剪接形式，L型和S型：


CD99在AML中的表达
人 CD99 在 AML 中上调。 CD99 在白血病干细胞 (LSC) 中上调更明显。与正常 CD34+CD38- 骨髓细胞相比，来自 AML 原始细胞的 CD34+CD38- 亚群中的 CD99 表达更高，并且 AML 原始细胞上的高 CD99 表达可能提示其为功能性的LSC。 Chung等人已经证明 CD99 的表达不同可将 AML白血病干细胞 (LSCs) 与功能正常的造血干细胞 (HSCs) 分开。在甲基纤维素铺板中，AML 细胞的 CD34+CD38- 群体中的 CD99 阴性细胞可产生类似于正常 HSC 的集落，也缺乏在AML 细胞中发现的白血病突变，这些细胞的异种移植模型也同样缺乏相关白血病突变。然而，CD99 阳性 CD34+CD38-AML 细胞的植入却可引起AML。人类 CD99 与 LSC 的关联也可以从 CD99 在复发AML的原始细胞中的高表达得到证实。


Vaikari 等人报道了 CD99 表达升高与 FLT3-ITD 突变存在之间的关联，FLT3-ITD 突变发生在约 30% 的 AML 患者中。 CD34+ 细胞中的 CD123/CD99/CD25(+) 亚群可预测 FLT3-ITD 突变，具有高特异性和敏感性。 CD99的表达也与AML中TP53突变的存在呈负相关。 与携带野生型 TP53 的患者相比，携带 TP53 突变的患者的 CD99 表达较低。 CD99过度表达的患者较少发生 TP53 突变。


CD99在CML中的表达
慢性粒细胞白血病 (CML) 是一种克隆性骨髓增殖性疾病，其特征在于存在由9/22染色体遗传易位导致的 BCR-ABL 融合癌基因，BCR-ABL 编码一种组成型活性酪氨酸激酶，导致细胞增殖。CD99 在 CML 中的表达和作用的数据有限。 一项研究报告说，与健康供体骨髓细胞相比，慢性期 CML HSC 的 CD99 水平较低。 Bloodspot 数据集 GSE13159 的分析表明，与 74 个健康样本相比，76 名 CML 患者的 CD99 表达显著降低（约 50%，P < 0.0001） 。 在携带 BCR-ABL 易位的慢性髓细胞白血病细胞系 K562 中用抗 CD99 mAb 治疗，在体外没有显示出抗白血病活性。  


CD99在ALL中的表达
急性淋巴细胞白血病 (ALL) 是儿童中最常见的急性白血病，皮质胸腺细胞和 T-ALL细胞均高表达CD99，高于正常外周血淋巴细胞。同一骨髓样本中，T-ALL细胞的CD99表达比正常T细胞增加了近8倍。 然而值得注意的是，至少 15% 的 T-ALL 病例没有强烈表达 CD99，这与白血病亚型无关，可能这些白血病是在胸腺细胞成熟期间恰好CD99表达下调而CD3表达增高时发生的。

CD99对检测骨髓和外周血中的 T-ALL MRD比较有用。 由于 CD99 是一种表面标志物，可通过细胞表面染色就能进行MRD检测，所以便利性上面比TdT要好。不过，要小心的是，在诱导化疗期间 CD99 和 TdT 的表达也可能下降，容易导致MRD分析出现误判。此外，研究表明，T-ALL中CD99- 或 CD99+ 两群在体内的细胞增殖没有差异，两个亚群都能够自我更新。

CD99 在B 细胞前体 (BCP) 中也是高表达的，而在分化的 B 细胞中表达显著降低。 然而，正常 BCP 细胞和 BCP-ALL 细胞的人类 CD99 表达水平相似。 值得注意的是，只有 CD99L亚型在正常 BCP 中表达。在正常 BCP 细胞中，CD99S型的 mRNA 和蛋白质表达在未成熟细胞中最高，并且随着成熟而表达降低，从而推测CD99L型在 BCP 分化中起作用，而不是S型。  

CD99高表达 与高风险 BCP-ALL 相关，如 BCR-ABL1、CRLF2-重排（ CRLF2Re)
CD99高表达与高危BCP-ALL儿童患者的不良临床结果以及复发风险增加（55%）相关。

而TCF3-PBX1融合基因阳性的BCP-ALL往往CD99 表达降低。

CD99在CLL中的表达
慢性淋巴细胞白血病（CLL）是发达国家最常见的白血病。在 CLL 中，主要为CD99L型，几乎没有S型。以GSE13159 数据集来检查健康骨髓和 CLL 样本之间 CD99 的差异表达，在 448 名患者中，发现 CLL 样本中的 CD99 比 74 名健康骨髓样本中的 CD99 高 1.5 倍（P<0.0001），原因是因为CD99 受 MMP9 调节，MMP9 的沉默导致 CLL 中 CD99 表面表达增加。


最后来看一下CD99在各类恶性血液病中的表达强度对比：



信源：Atham Ali，et al. CD99 in Malignant Hematopoiesis ,Experimental Hematology（2021), doi:https://doi.org/10.1016/j.exphem.2021.12.363

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似乎拿来当幼稚的标记不靠谱