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悬赏2流星未解决
实验内容:在工具细胞293T中瞬转表达膜蛋白,并进行流式检测
实验结果:细胞膜蛋白表达阳性比例或者平均荧光强度随着质粒用量下降而下降。但发现一个现象:2种单克隆抗体结合后的阳性细胞表现不同:1抗体结合后的细胞群体松散,平均荧光强度达到8377(对照为97);而2抗体结合的群体更紧密,平均荧光强度1216(对照为106) 。[实验中使用了2种单克隆抗体,1是直接偶联PE的;2是未标记抗体,实验中使用PE偶联的二抗进行检测]
想请教的问题:
1.我预计是2抗体结合的群体应更偏右,信号更强(因为二抗的放大效应),但结果相反。可能的原因是什么?
2.两种抗体结合同种细胞后呈现的流式图差别大(松散程度),可能的原因是什么...
自己思考后总是纠结于一抗和二抗的用量问题,但又觉得这不是决定因素....,想请假下大家!
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