流式细胞仪检测外泌体

吹散的蒲公英

倪老师以及各位流式专家，最近有个同事想用流式细胞仪检测外泌体，他年前刚好提取的外泌体有一部分剩余，最近用BD的Fortessa流式细胞仪检测，发现在FSC和SSC散点图上找不到，阈值调到最低虽然能看到很高的细胞浓度，但是散点图依然是一片空白。
请问大家有没有尝试用流式细胞仪检测过外泌体，是否检测到？

niwanmao

外泌体能放那么久吗？
首先跟样本有关，其次Fortessa是否能测100nm以下的颗粒呢？

吹散的蒲公英

niwanmao 发表于 2022-3-22 16:39
外泌体能放那么久吗？
首先跟样本有关，其次Fortessa是否能测100nm以下的颗粒呢？ ...

倪老师，您好，我就是没查到相关的资料，所以不清楚我们的仪器能否检测到这么小的颗粒，所以想问问大家有没有人尝试过流式检测，是否可行。
关于外泌体的存放时间，那个同事告诉我没有问题，不过我们也不完全确定是否因为存放太久影响了外泌体的完整性。不过当时没检测到的时候我就建议他下次提取新鲜的外泌体再试试。

niwanmao

吹散的蒲公英 发表于 2022-3-23 15:38
倪老师，您好，我就是没查到相关的资料，所以不清楚我们的仪器能否检测到这么小的颗粒，所以想问问大家有 ...

我记得常规流式细胞仪要测，都得用微球捕获才行。只有纳米流式仪才能直接测。

吹散的蒲公英

niwanmao 发表于 2022-3-23 18:20
我记得常规流式细胞仪要测，都得用微球捕获才行。只有纳米流式仪才能直接测。 ...

谢谢倪老师的耐心解答！
我们咨询了单位别的科室，他们有人用很普通的流式细胞仪检测到了外泌体。
而且我们的流式细胞仪之前检测过300nm的囊泡都是可以的，只是外泌体比囊泡还要小一半，所以当时没检测到我们不清楚是不是到了仪器检测的极限。
现在看来，极有可能是那天的外泌体有问题，回头我们再试试，有结果我会及时跟大家分享。

niwanmao

吹散的蒲公英 发表于 2022-3-24 11:34
谢谢倪老师的耐心解答！
我们咨询了单位别的科室，他们有人用很普通的流式细胞仪检测到了外泌体。
而且我 ...

胞外囊泡相对大一些，所以300nm以上测测问题不太大。
但是外泌体大多在200nm以下，大多数机器应该都不行。

之前我分享过一个PPT，站内搜一下可搜的到，列出了不同机型的胞外囊泡检测能力：

hannotech

可以关注一下福流生物的纳米流式平台，最小检测粒径7nm(金纳米颗粒)，40nm(外泌体/病毒)

bslhk

一般的流式直接测不到，你可以买一些可以结合外泌体的微球就好了

吹散的蒲公英

bslhk 发表于 2022-3-25 13:18
一般的流式直接测不到，你可以买一些可以结合外泌体的微球就好了

好的，谢谢您的建议！我们回头有机会再试试。

吹散的蒲公英

hannotech 发表于 2022-3-25 10:13
可以关注一下福流生物的纳米流式平台，最小检测粒径7nm(金纳米颗粒)，40nm(外泌体/病毒) ...

好的，谢谢您的建议，只是我们的流式平台目前四台流式仪器全部是BD仪器，可能暂时不方便更换平台。