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悬赏2流星未解决
Hi 各位战友,第一次做小鼠的腹腔灌洗液,有很多疑问,请相关同行指教。
首先C57BL/6小鼠,用5ml PBS灌洗后得到腹水,裂红后染色上机。
下图一是 小鼠腹水,其中Live/dead 部分没有圈右上细胞,虽然这群细胞在前侧向中正好是巨噬的位置,但由于这群细胞表达几乎所有通道,所以没有圈上。
但这样的话腹水里的巨噬比例就太少,只占CD45+的1%左右,也不对劲。
小鼠 腹水 去除可能dead cell
下图二, 也是小鼠腹水,将Live/dead 部分连带右上细胞都圈上,NKT猛增,补偿后确实可以把异常的NKT调节到CD3-CD49b-,但巨噬占CD45+的比例也只有20+%。
小鼠 腹水 全部细胞
放一张图三是 小鼠血液,看上去问题不大,CD49b的通道应该需要换个更亮的。
小鼠 血液
请各位帮忙看看,
1:panel各位觉得有什么必须要改进的地方吗?
2:小鼠腹水的图就长这样吗?巨噬的live/dead为啥这么高,这群细胞的背景值大?我现在觉得是这群很容易染上非特异性,请问大家的腹水也是这样吗?我们的腹水收集方案有需要调整吗?
3:普通小鼠的腹水,不做刺激,CD163比例就是这样吗?谢谢!CD163胞内胞外染都试过,结果差不多。
谢谢!
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