感觉我自己调的补偿不对，但又不知道怎么改

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老师们，这是我自己看视频学的调补偿，但是并不能达到视频里说的 横平竖直 那样，请问我该怎么改呢，还是我的步骤有误

阴性设门


pi单染


fitc单染管


补偿图片

Climber

不知道为啥 看不到你发的图片

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Climber 发表于 2022-4-14 16:08
不知道为啥 看不到你发的图片

老师您好，我重新保存到PDF了，请您再帮忙看一下

niwanmao

主要原因是你这里没有明显的阳性群体，所以无法衡量阳性和阴性群的中位数是否一致。

另外，你的图片无法显示，是因为你可能直接将图片拖入了编辑框，导致图片成为了BASE64编码，所以无法显示出来。以后请通过“高级模式”下的编辑框工具栏上的图片按钮，上传图片。

Climber

另一方面，您的阴性群和阳性群的荧光值似乎都太高了，建议调整合适的电压将阴性群的荧光值控制在10^2左右，阳性群控制在10^4左右，调补偿时可以选择一些高表达maker作为阳性群 比如CD4 CD8

Yuck

你选的marker阳性不明显，直接换补偿微球吧

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niwanmao 发表于 2022-4-14 21:27
主要原因是你这里没有明显的阳性群体，所以无法衡量阳性和阴性群的中位数是否一致。

另外，你的图片无法显 ...

啊，老师，我听不懂 ，是哪里没有阳性群体，单染管调补偿那里吗，那个不是峰值高就是阳性吗

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Yuck 发表于 2022-4-15 09:35
你选的marker阳性不明显，直接换补偿微球吧

老师好，绿色的峰值不是代表阳性吗？还是我理解错了，我不是很明白。。。

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Climber 发表于 2022-4-14 21:38
另一方面，您的阴性群和阳性群的荧光值似乎都太高了，建议调整合适的电压将阴性群的荧光值控制在10^2左右， ...

老师好，调电压是不是用空白组（只有细胞）上机的时候调，还有，调补偿时maker是指选择通道吗还是啥

niwanmao

13110789723 发表于 2022-4-15 11:04
啊，老师，我听不懂 ，是哪里没有阳性群体，单染管调补偿那里吗，那个不是峰值高就是阳性吗 ...

要用单染管调节补偿，单阳性必须要有明显阳性群体，这种稀稀拉拉几个信号，中位数容易不准确。