选用了7种抗体，是否都需要按照说明书剂量加样

hlkcn1990 · 发表于 2022-5-16 11:25:51

请问下各位站友，实验选择了7种抗体，通道依次为：BV711，PE-Cy7，BV785，percp-cy5.5，APC-Cy7，FITC，BC605

按照说明书或者文献的用量太大了，可能不能做几次实验就用完抗体了。课题组经费比较紧张，所以想请问下各位做过类似几个通道的站友，每种通道的抗体一般100μl里加多少就足够染色了，谢谢大家！

Yuck · 发表于 2022-5-16 13:27:45

自己做滴度实验，确认最佳检测用量。

bslhk · 发表于 2022-5-17 08:39:32

经验上说，一般减半是没有问题的，想要具体的就固定你的的细胞浓度，然后做一下抗体滴定

niwanmao · 发表于 2022-5-17 09:34:14

尽量参考说明书。
如需减少用量，首先将染色体积减小到50ul，可实现减半，其次，做一下滴定，看看是否能再减

hlkcn1990 · 发表于 2022-5-17 23:49:14

Yuck 发表于 2022-5-16 13:27
自己做滴度实验，确认最佳检测用量。

谢谢解答！

hlkcn1990 · 发表于 2022-5-17 23:49:34

bslhk 发表于 2022-5-17 08:39
经验上说，一般减半是没有问题的，想要具体的就固定你的的细胞浓度，然后做一下抗体滴定 ...

谢谢解答！

hlkcn1990 · 发表于 2022-5-17 23:49:50

niwanmao 发表于 2022-5-17 09:34
尽量参考说明书。
如需减少用量，首先将染色体积减小到50ul，可实现减半，其次，做一下滴定，看看是否能再 ...

谢谢解答！我做一下滴定实验看看

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